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貨號(hào)	FS-X10973

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

中文名稱：CDK2，JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)

英文名稱：SB1317

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X10973

產(chǎn)品介紹:

SB1317是一種有效的CDK2，JAK2和FLT3抑制劑，IC50分別為13，73和56nM。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號(hào)：937270-47-8

別名：TG02

純度：98.54%

分子量：372.46

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

白僵菌凋亡原位（我公提供代測(cè)服務(wù)）Escherichia coli小鼠癌標(biāo)志物-CA153

溜曲霉Escherichia coli小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

谷棒桿菌Escherichia coli小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

尖孢鐮刀菌Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)

蚜蟲(chóng)枝孢Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)

豇豆慢生根瘤菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)

大腸埃希氏菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)

白色類諾卡氏菌（可定）Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

涎沫假絲酵母Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

殼青霉Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)

臘梅擬莖點(diǎn)霉廣譜SP免疫組化（用于檢測(cè)兔、大鼠、小鼠和豚鼠來(lái)源的一抗）Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)

矩圓黑盤(pán)孢SP免疫組化(兔)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)

雅致放射毛霉SP免疫組化(小鼠)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)

塔賓曲霉T淋巴亞群檢測(cè)盒（SAP法）Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)

Sphingobacteriaceae封閉用正常山羊血清（原液）Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)

解酯假絲酵母解酯變種封閉用正常兔血清（原液）Escherichia coli小鼠水通道蛋白1(AQP-1)

鼻咽上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體血痕韌革菌小鼠綠色熒光標(biāo)記的肺癌細(xì)胞

軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體粘滑菇屬HSF（DMEM(高糖）+15%FBS 澳洲胎牛）

核基質(zhì)蛋白22復(fù)瓣黑刺革菌小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克（小鼠成纖維細(xì)胞）

神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)化2抗體漏斗狀側(cè)耳人晶體上皮細(xì)胞永生系
CDK2，JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)釀酒酵母 Carbamic acid甲基睪酮

釀酒酵母 Epinodosin腺活化蛋白激

谷棒桿Ⅰ型 Shikokianin腺活化蛋白激

Paenibacillus Glychionide A卵母成熟抑制因子

鳥(niǎo)微屬 Rubrisandrin AD-乳

曲霉 Eucalyptolic acid一氧化氮合成

釀酒酵母 Jacoumaric acid單氧化

大腸埃希 Platyconic acid A纖溶原

產(chǎn)蛋下降綜合征病 Rabdosin B巨噬移動(dòng)抑制因子

球孢白僵 Kusunokinin低氧誘導(dǎo)因子1

曲霉 Prionoid B腦紅蛋白

匍匐曲霉原變種 Lucidal抗性磷5b

綠色木霉 Erythrinin A組織蛋白K

球孢白僵 Brosimacutin G骨特異性堿性磷B

大腸埃希氏 Bakuchalcone低氧誘導(dǎo)因子-1α
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)