實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴增曲線
在Real-time qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
DSMZ20259模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptococcus│thermophilus奶提供形式: 凍干物用于益生菌類保健食品。培養(yǎng)基: CM0790

根瘤菌固氮模式菌株: no雨樹根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 63生長條件: 28-30

粗壯假絲酵母生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 -98℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077用于啤酒。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法

谷氨棒桿菌培養(yǎng)基: CM0002產(chǎn)谷氨。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法；定期移植法

煙曲霉產(chǎn)生真菌素模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C

光硬皮馬勃培養(yǎng)基: 17模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法

嗜鹽潮間帶桿菌海洋細(xì)菌模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃

豬鏈球菌研究模式菌株: no鼻腔拭子提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 396生長條件: 37

 -99℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

龐蒂亞克亞硫鹽桿菌培養(yǎng)基: 471南大西洋細(xì)菌沉積物/TVMC沉積物(0-3cm)提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

米曲霉產(chǎn)蛋白酶模式菌株: no醬曲提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 25~28℃

鯊魚弧菌培養(yǎng)基: 467potential antifouling 潛在的抗污損活性水樣/上層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

假交替單胞菌培養(yǎng)基: 821產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株 產(chǎn)酶微生物/蛋白酶、脂酶（三丁甘油酯）沉積物/深灰色沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

沙門氏菌流行病學(xué)調(diào)查和細(xì)菌耐藥性檢測模式菌株: no雞拭子提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃

曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EMB)2250g藥品中大腸桿菌、沙門氏菌檢測。

Nutirent Broth No.2 2 號營養(yǎng)肉湯 Oxoid 500g incubation media Nutirent Broth No.2 2 號營養(yǎng)肉湯 Oxoid 500g

釀酒酵母 支/瓶

山梨醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ)(SMAC)250g大腸桿菌O離培養(yǎng)

CaseinDigestSoyLecithinPolysorbate20Medium

卵黃甘露醇高鹽瓊脂基礎(chǔ)  Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base  250克  金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)

改良Giolitti-Cantobi肉湯  Modified Giolitti-Cantobi Broth  250克  金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)

甘露醇鹽瓊脂  Mannitol Salt Aga  250克  金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)

卵黃瓊脂培養(yǎng)基  Egg-Yolk Salt Agar  250克  金黃色葡萄球菌的選擇性分離
人細(xì)小病毒B19核酸檢測試劑盒變形桿菌成套生化鑒定管（BXWS）規(guī)格：13種*1套/盒*10盒用途：用于變形桿菌的生化鑒定。組成：尿素酶1支、丙氨酶1支、西蒙氏枸櫞鹽1支、鳥氨脫羧酶1支、氨基脫羧酶對照1支、明膠生化管1支、脂酶(玉米油) 1支、D-甘露醇1支、色氨肉湯1支、麥芽糖1支、木糖1支、水楊苷1支、七葉苷水解1支、無菌液體石蠟1支。

DL-色氨規(guī)格：5g用途：微生物指示劑

含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板（7cm）規(guī)格：10個/包用途：用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無菌檢測

麥芽糖發(fā)酵管規(guī)格：20支詳情介紹

玉米粉瓊脂規(guī)格：250g用途：用于真菌培養(yǎng)

乳糖-明膠培養(yǎng)基規(guī)格：95g用途：產(chǎn)品說明及用途