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貨號 | FS-X10751 |
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中文名稱:人I型PRMTs抑制劑(MS023)
英文名稱:MS023
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10751
產(chǎn)品介紹:
MS023是一種有效的,有細胞活性的,選擇性人I型PRMTs抑制劑,IC50為4-119nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1831110-54-3 純度:99.84% 分子量:287.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
光黑腹菌生物偶聯(lián)血藍蛋白Anti-GPBAR1 Antibody人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
凍膠假絲酵母生物偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPC1 Antibody人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
湖底肉桿菌BK通道蛋白多肽Anti-GPC5 Antibody人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
金灰青霉重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2Anti-GPR1 Antibody人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
Acinetobacter preuotii sp.重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7Anti-GPR107 Antibody人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
門多薩假單胞菌炭疽桿菌菌體蛋白Anti-GPR101 Antibody人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
黃叉曲霉CD105蛋白Anti-GPR119 Antibody人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
菌核青霉瓜環(huán)肽Anti-GPR108 Antibody人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
大腸埃希菌C-反應蛋白(抗原)Anti-GPR12 Antibody人透明質(HA)
癭青霉克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR132 Antibody人透明質(HA)
膜醭假絲酵母克侖特羅偶聯(lián)血藍蛋白Anti-GPR135 Antibody人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)
香菇畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)N端Anti-GPR132 Antibody人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)
芽孢桿菌角蛋白19多肽抗原Anti-GPR137C Antibody人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)
白色類諾卡氏菌人癌胚抗原抗原Anti-GPR142 Antibody人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)
冷桿菌CD105/轉化生長因子β受體抗原Anti-GPR139 Antibody人層連蛋白/板層(LN)
棘抱曲霉半胱蛋白蛋白-6(抗原)Anti-GPR143 Antibody人層連蛋白/板層(LN)
痙攣性截癱相關蛋白21抗體謝氏桿菌人軟骨肉瘤細胞
G蛋白結合蛋白3抗體丁梭菌(丁桿菌)小鼠肺微血管內皮細胞
SPG48蛋白抗體痤瘡桿菌人彌漫大B淋巴瘤細胞
痙攣性截癱蛋白7/基質細胞粘附調節(jié)蛋白抗體生孢梭菌(產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌)人多發(fā)性骨髓瘤細胞
人I型PRMTs抑制劑(MS023)釀酒酵母 牛肉浸粉25羥基維生D
血桿 3-氨基-4-甲氧基線粒體呼吸鏈復合物I
海洋桿 瓊脂糖煙酰腺二核
枯草芽孢桿 細學瓊脂雌馬
屎腸球 4-氨基-3-大豆異黃酮
Bacteroides sp. 酵母粉布氏桿抗體
島生異擔子 胰蛋白胨還原型輔Ⅰ
催娩克雷伯氏 2-氨基-5-線粒體呼吸鏈復合物II
遲緩愛德華氏 供體馬血清線粒體呼吸鏈復合物III
淡藍褐糖絲 5-氨基鄰甲線粒體呼吸鏈復合物IV
蜂頭蟲草 胎牛血清[南美血清]激肽釋放3
熒光威克酵母 2-氨基二苯甲酮心水病抗原
白僵 青霉鏈霉溶液 雙抗球蛋白E
白色鏈霉白色變種 胰蛋白溶液球蛋白G1
大腸埃希 對氨基苯甲酰α酪蛋白
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