當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T貓源性成分(Feline)核酸檢測試劑盒
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
貓源性成分(Feline)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10522 |
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
嗜水氣單胞菌 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法生長條件: 22℃提供形式: 凍干物;凍結(jié)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 820
-820℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
疣孢漆斑菌生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
CCRC11039=CGMCC1.1527=IFO3851=JCM1668=NCT=ATCC13315內(nèi)切酶PvuⅠⅡ, Type strain,模式菌株: yes種屬: Proteus vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂 :蛋白胨10.0 g,牛肉提取物 3.0 g,NaCl 5.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0生長條件: 37℃,好氧
CMB0214食用、藥用模式菌株: no種屬: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃
坐皮膚球菌海洋放線菌模式菌株: no沉積物/TVG沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28-30℃
BCRC14721=ATCC13623生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 142種屬: Tetragenococcushalophilus安全等級: 1模式菌株: no
檸檬形克勒克酵母培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no葡萄提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-821℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
紅曲霉生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
B298堿性蛋白酶模式菌株: no種屬: Bacillus│pumilus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃
球毛殼菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no竹體表提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-27 定期移植法
副球菌培養(yǎng)基: 471近海細菌沉積物/表層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 20-25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
O1群霍亂弧菌培養(yǎng)基: CM0116O1/eltor 小川(Ogawa)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
馬鏈球菌獸疫亞種模式菌株: 未知
-822℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
1-二甲基基-2-硝基 順式-3-己烯醇 2-甲基-2-丁烯酯 3-甲基-1,3丁二醇
對二基醚 乙異龍腦酯 4-硝基鄰二酐
S-聯(lián)酚磷酯 3,3-硫代雙丙二(十四烷醇)酯 4-基甲酰
4-異丙基鹽鹽 2,2'-硫代二乙基雙[3-(3,5-二叔丁基-4-羥基)丙酯] N,N-二芐基羥胺
Furfuryl methyl sulfide 糠基甲基硫醚 1438-91-1
Raney-Nickel catalyst (with about 50% water) 雷尼鎳催化劑
BENZYL 3-BROMOPROPYL 3-芐氧基溴丙烷 54314-84-0
BENZYL 2-BROMO 2-芐氧基溴乙烷 1462-37-9
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA試劑盒 ,英文名: REG-1a ELISA Kit
人碳酐酶(CA)ELISA檢測試劑盒Humancarbonicanhydrase,CAELISAKit 96T/48T
大鼠白介素5(IL-5)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 5,IL-5 ELISA KIT
CLIAKitfoGF-Beta1(HumanansformingGrowthfactorBeta1)ELISAkit人轉(zhuǎn)化生長因子β1規(guī)格:48T/96T
全組織蔗糖酶活性染色試劑盒10次
ELISAKiANA人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體規(guī)格:48T/96T
貓源性成分(Feline)核酸檢測試劑盒可可83-67-0英文名:Theobromine
英文別名:Theosalvose; Theostene
登錄號:83-67-0
分子式:C7H8N4O2
分子量:180.16
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色單斜形針狀結(jié)晶性粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等
提取來源:梧桐科植物可可
溶解性:微溶于水、中度溶于胺,不溶于、醚、和
熔點:290-295℃
藥理藥效:磷二酯酶抑制劑;弱腺苷受體拮抗劑,平滑肌松弛劑。醫(yī)藥上可可具有利尿、心肌興奮、血管舒張、平滑肌松弛等作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
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