瑞氏-姬姆薩染色液-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-X9854

產(chǎn)品介紹:

產(chǎn)品簡介：

瑞氏-姬姆薩染色液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。細(xì)胞的著色過程是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程，此過程既有物理吸附作用，又有化學(xué)親和作用。各種細(xì)胞及細(xì)胞的各種成分由于其化學(xué)性質(zhì)不同，對瑞氏-姬姆薩染色液中的酸性染料(曙紅)和堿性染料的親和力也不一樣。因此，標(biāo)本涂片經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色液染色后，相應(yīng)各類細(xì)胞呈現(xiàn)不同的著色，從而達(dá)到辨別其形態(tài)特征的目的。

瑞氏-姬姆薩染色液是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制，主要用于血液和骨髓涂片，細(xì)菌等染色。

儲存條件：室溫密封保存。

有效期：一年。

中文名稱：瑞氏-姬姆薩染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：200ml

貨號：FS-X9854

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

D-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： TeniposideB和T淋巴衰減蛋白抗體包裝5g

D-(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： TeniposideCD4抗體包裝150

D-甘露糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Tenofovir disoproxil fumarateCD44抗體包裝2050

D-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate白共同抗原抗體包裝580

D-環(huán)絲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： TenoxicamCD5抗體包裝5g

D-焦谷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Terbinafine 間粘附分子-1抗體包裝25g

D-木糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Terbinafine 神經(jīng)粘附分子1抗體包裝5g

D-絲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Terbinafine HClL選擇抗體包裝25g

Deoxycorticosterone acetate...英文名： Terbinafine HClCD68抗體包裝5g

Dexamethasone Acetate（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Teriparatide acetate/Human PTH(1-34)6號染色體開放閱讀框226抗體包裝100g

Dexamethasone Sodium Phosph...英文名： Terlipressin Acetate間隙連接蛋白30抗體包裝25g

Dexamethasone（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Thiamphenicol2號染色體開放閱讀框69抗體包裝25g

Diethylstilbestrol（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Thiamphenicol3號染色體開放閱讀框18抗體包裝5g

DL-精（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Thymopentin Acetate巨噬炎癥因子1β /MIP-1β抗體包裝1g

Donepezil HCl type III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Tiagabine HCl外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子抗體包裝5g

結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)血吸蟲試劑盒熊果乙酯;Acetylursolic

威尼斯不動桿菌Acinetobacter│venetianus 質(zhì)量規(guī)格：≥675 U/mg,USP28血栓B2試劑盒細(xì)辛;2,4,5-Trimethoxy

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：含量測定血栓A2合成試劑盒香葉;Geraniol
瑞氏-姬姆薩染色液鏈格孢 2-巰基-6-甲氧基苯并噻唑脯羥化3

橙色桿孢囊環(huán)己基乙烯基CD9分子

大腸桿丁吡尿香草扁桃

長枝木霉烯基-1,3-磺內(nèi)酯Wnt-5a蛋白

馬來西亞鏈霉氮雜環(huán)丁烷-3-叔丁酯鹽鹽蛋白質(zhì)賴甲基轉(zhuǎn)移

平菇 1-甲基胍鹽鹽蛋白精甲基轉(zhuǎn)移1

產(chǎn)氣莢膜梭 C型 3-氟-5-酚二甲基精二水解1

微桿 (S)-3-叔丁氧羰基氨基二甲基精二水解2

納西桿 6-(三氟甲基)吡啶-3-二甲基精二水解1

赤褐鵝膏 6-苯基-3-噠酮二甲基精二水解2

大腸埃希氏桿 2-氨基-5-叔丁基噻吩-3-甲甲酯中性粒趨化因子

玫瑰色考克氏 2-氨基嘧啶-4-羧甲狀旁腺

平菇(黑平1號) 4-(4-甲基-1-哌)芐α7煙堿型乙酰受體

褐囊蜜環(huán) 3-硝基-2-羧基甲酯腐

乙酰微小桿環(huán)甲酰酮解脲脲原體

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