您好, 歡迎來到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T肉色諾卡菌核酸檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
肉色諾卡菌核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P9768 |
PCR技術(shù)的定量原理:
?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
小鼠腹水瘤;S-180形態(tài)特性: 圓形生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)Anti-DNTT Polyclonal Antibody
雞胚成纖維(自發(fā)轉(zhuǎn)化);UMNSAH/DF1形態(tài)特性: 成纖維樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-INHBA Polyclonal Antibody
猴腎;VeroIgCD4形態(tài)特性: 上皮樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-IL12 Polyclonal Antibody
猴腎;veroIgRCD4-形態(tài)特性: 上皮樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-CPEB4 (N-term) Polyclonal Antibody
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8形態(tài)特性: 淋巴母樣生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)Anti-SAA4 Polyclonal Antibody
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6形態(tài)特性: 淋巴母樣生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)Anti-ASPH Polyclonal Antibody
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12形態(tài)特性: 淋巴母樣生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)Anti-CD5 Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-A4形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-SQLE Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-A2形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-ANKH Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-A5形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-NDUFV1 Polyclonal Antibody
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3形態(tài)特性: 淋巴母樣生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)Anti-TRPV3 Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-B1形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-LAMP3 Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-B4形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-GTF2H3 Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-C2形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-SLC16A4 Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-B2形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-CTSE Polyclonal Antibody
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干;PUMC-mips-C4形態(tài)特性: 克隆樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)Anti-RhoA Polyclonal Antibody
肉色諾卡菌核酸檢測(cè)試劑盒大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒FⅫELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒FABPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒FAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒FAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒FAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒FAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒FAKELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒FASELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。