當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T駱駝種特異性基因核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
駱駝種特異性基因核酸檢測試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P10232 |
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
I-3北京制藥廠產(chǎn)維生素C模式菌株: no種屬: Gluconobacter│oxydans提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0001生長條件: 30℃
黑曲霉培養(yǎng)基: CM0085糖蜜檸檬。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法;其他
鏈霉菌屬菌種培養(yǎng)基: CM0012產(chǎn)生抗螟蛉抗菌素提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
鹽反硝化枝芽孢桿菌共生微生物/海螺共生菌模式菌株: no生物樣/海螺提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃
類諾卡氏菌潛在的新種,海洋放線菌模式菌株: no水樣/CTD水樣(-7001m)提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃
球孢白僵菌培養(yǎng)基: 14害蟲生物防治提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28 定期移植法
-151℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
冰島硫化葉菌生長條件: 80℃培養(yǎng)基: 453提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法;定期移植法
柴油食烷菌有機污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no沉積物/熱液區(qū)深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃
稀有桿菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
東北巨大生長條件: 30-37℃培養(yǎng)基: 2種屬: Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn安全等級: 1模式菌株: no
紅色糖多孢菌培養(yǎng)基: CM0413產(chǎn)生Erythromycin紅霉素提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 36C 真空冷凍干燥
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077釀造醬油。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法
-152℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)基: 266模式菌株: no蟲尸提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法
炭疽芽胞桿菌培養(yǎng)基: CM0116研究提供形式: 其他安全等級: 3模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
FBPSolution
m-TGE肉湯 m-TGE Broth 奶制品中濾膜法細(xì)菌總數(shù)計數(shù)
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(高PH) Antibiotic Agar 250 鏈霉素,卡那霉素,慶大霉素,紅霉素等效價測定
SSDC培養(yǎng)基250g/瓶小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的選擇性分離(ISO)incubationmediaSSDC培養(yǎng)基250g/瓶小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的選擇性分離(ISO)
0.85%無菌鹽水(10ml/支) 10ml/支*20 樣品稀釋處理
濾膜糞大腸菌肉湯 M-FC Broth 250克 大腸桿菌群的濾膜法檢測
肉浸液瓊脂 Meat Infusion Agar 250克 一般細(xì)菌培養(yǎng)
西蒙氏枸櫞鹽瓊脂 Simmons Citrate Agar 250克 腸道菌的檸檬鹽利用試驗
克氏檸檬鹽培養(yǎng)基 Christensen Citrate Medium 250克 腸桿菌鑒別
駱駝種特異性基因核酸檢測試劑盒BCYE瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:可溶性焦磷鐵用途:0.025g每支含量
GC瓊脂規(guī)格:250g用途:用于淋球菌的分離培養(yǎng)
乳桿菌肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于乳桿菌增菌培養(yǎng)
硫乙醇鹽流體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于藥品,生物制品無菌試驗,培養(yǎng)基,厭氧菌
李氏菌增菌肉湯規(guī)格:萘啶用途:4.0mg
伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(Levine)規(guī)格:250g用途:弱選擇性培養(yǎng)基、用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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