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貨號 | FS-X10323 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:SU5416 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg SU5416是一種有效的選擇性VEGFR(Flk-1/KDR)抑制劑,抑制酪氨suan激酶催化作用,且抑制Flk-1受體自磷酸化,IC50為1.23±0.2μM(n=4)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:204005-46-9 別名:Semaxinib 純度:99.93% 分子量:238.28 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱:VEGFR(Flk-1/KDR)抑制劑
英文名稱:SU5416
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10323
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
鐮刀菌屬有絲分裂周期蛋白MPP9抗體Human ODAM 神經(jīng)粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)
小平菇(秀珍菇)減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Human NXN 神經(jīng)調(diào)節(jié)1亞型HRGβ1(NRG1)
枯草芽孢桿菌肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體Human ODF2 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)
白地霉珠蛋白1抗體Human ODF1 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)
間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體Human ODF3 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)
偶發(fā)貪銅菌G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體Human NXN 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)
類干酪乳桿菌黑色瘤相關(guān)抗原11抗體Human ODF2L 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)
MesorhizobiumG蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體Human HSP90AA1(Heat shock protein HSP 90-alpha) 神經(jīng)特異性烯化(NSE)
枯草芽孢桿菌麥芽糖結(jié)合蛋白抗體Human NUPL2 神經(jīng)肽Y(NP-Y)
加德那氏鏈霉菌肌球蛋白XVIIIb抗體Human NUP93 神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)
鏈霉菌MAL蛋白抗體Human NXPH1 神經(jīng)絲蛋白M(NF-M)
綠梭鏈孢麥芽糖孔蛋白抗體Human NUPL1 神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)
束紅球菌蕈堿樣蛋白3抗體Human NUP98-NUP96 神經(jīng)絲蛋白H(NF-H)
墨汁鬼傘巨噬清道夫受體1抗體Human NUR77 神經(jīng)絲蛋白(NF)
棗生梅奇酵母牛結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體Human NUS1 神經(jīng)生長因子受體(NGFR)
水生黃桿菌T淋巴成熟相關(guān)蛋白抗體Human Nurr1/NR4A2 神經(jīng)生長因子前體(proNGF)
桃木腐層孔菌Fomes│fulvus (Scop.) Gillet 質(zhì)量規(guī)格:銅用超高靈敏分光光度試劑D-(-)-奎寧
巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)桑色
: ATCC16404資源名稱: 黑曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)西紅花II
VEGFR(Flk-1/KDR)抑制劑布魯氏 生物Ⅱ型 3,3-二甲基-4-戊烯甲酯Tau蛋白
盤長孢狀盤孢 貝丁酯Toll樣受體2
副豬嗜血桿 3--4-氨基吡唑鹽鹽Toll樣受體4
粉紅單端孢霉 6-甲氧基-2-(4-甲氧苯基)苯并噻吩Toll樣受體9
Oerskovia enterophila 2-噻吩甲T亞群
意大利酵母 4-羥基間苯二甲V型ATP
布魯氏 生物Ⅴ型 2-溴-5-甲氧基WNT抑制因子1
金霉鏈霉(生金色鏈霉) 5-溴-2-甲氧基苯α1性糖蛋白
無 2-氨基-4--5-α1-微球蛋白
圓酵母屬 2--5-氨基α7型神經(jīng)煙堿能受體
白色彎曲嗜 4--5-嘧啶αL巖藻糖
赤霉屬 3-甲氧基羰基苯磺酰α-氨基羥甲基惡唑
大腸埃希氏 2-氨基-5-α淀粉
枝狀枝孢 6-庚炔α-防御
節(jié)桿 2,5-二氫吡咯鹽鹽α干擾
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