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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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Chk1抑制劑(LY2606368)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 12:57:38瀏覽次數(shù):166次

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貨號(hào) FS-X10371
Chk1抑制劑(LY2606368)正在熱銷的產(chǎn)品:SAP-1/FITC 熒光標(biāo)記抗突觸抗體IgG[Tyr4] Bombesin ≥97% (HPLC)
Synapsin I /FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)突觸1抗體IgG[D-Phe7]-Bradykinin acetate salt
Syntrophins/SNTA1/Syntrophin α1/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:LY2606368

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

LY2606368是一種有效的,選擇性的,ATP競(jìng)爭(zhēng)性的Chk1抑制劑,Ki值為0.9nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):1234015-52-1

別名:Prexasertib

純度:99.13%

分子量:365.39

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱:Chk1抑制劑(LY2606368)

英文名稱:LY2606368

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10371

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

解脂亞羅酵母腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體Human MBP/MBL(Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) 甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)

植物乳桿菌神經(jīng)激肽A抗體Human IgG(Immunoglobulin G) 甲狀旁腺激1受體(PTH1R)

松衫暗孔菌磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體Human S100A1/S100(Protein S100-A1) 甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)

側(cè)孢短芽孢桿菌磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human FE(Ferritin) 甲狀旁腺激(PTH)

短芽孢桿菌核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human sTfR1(Soluble Transferrin Receptor1) 甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)

釀膿鏈球菌膜相關(guān)蛋白Numb抗體Human FPA(Fibrinopeptide A) 甲酰甲硫(fMet)

茄鏈格孢谷受體2A抗體Human TF(Transferrin) 甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)

小煤炱菌屬磷化谷受體2B抗體Human AFP(alpha Fetoprotein) 甲基化(Methylase)

羊邊蟲(chóng)(綿羊無(wú)漿體—永壽株)谷受體2B抗體Human C-P(C-Peptide) 甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)

下彎巴克斯霉磷化核仁磷蛋白抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) 喋呤(MTX)

黃綠木霉磷化核仁磷蛋白抗體Human PI(Proinsulin) 己糖激3(HK3)

黃海芽孢桿菌磷化核仁磷蛋白抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) 己糖激(HK)

雙孢蘑菇(可訂購(gòu))核因子κB抑制蛋白β抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) 幾丁質(zhì)3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)

絲狀支原體山羊亞種磷化谷受體2A抗體Human C-P(C-Peptide) 幾丁質(zhì)1(殼三糖)(CHIT1)

晶粒鬼傘間質(zhì)衍化因子受體1抗體Human PI(Proinsulin) 集落激因子(CSF)

青色鏈霉菌神經(jīng)分化因子2抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) 集蛋白亞家族成員11(COLEC11)

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000防己諾林堿

枯草芽胞桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:10000粉防己堿

楚氏喜鹽芽胞桿菌Halobacillus│trueperi 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:90000輔Q10
Chk1抑制劑(LY2606368)成團(tuán)泛 2,2-二甲基丁周期E

栗疫 N-叔丁氧羰基-L-絲周期抑制蛋白p27;Kip1

釀酒酵母 2-酮纖連蛋白

香菇 乙烷磺纖溶抗纖溶復(fù)合物

ATCC 14028 叔丁基鋰?yán)w溶原

土生類諾卡氏 硫胍纖溶原激活物抑制因子

葡萄糖桿屬 偶氮甲堿H纖溶原激活物抑制因子1

桔青霉 基膦纖溶抑制因子;凝血激活的纖溶抑制物

黃色單胞 1-Boc-吡咯烷-3-甲纖維蛋白肽A

美澳型核果褐腐病 反式-3-(基硅基)烯纖維蛋白原

釀酒酵母 外-6-羥基托品酮纖維蛋白原

Glarea lozoyensis 4-硅基-3-丁炔-2-酮酰腺二核磷

釀酒酵母 2--5-甲基吡酰基;膽固?;D(zhuǎn)移

紫產(chǎn)色鏈孢囊 2,6-二氟二苯甲酮線粒體膜通道孔

鑲邊鏈霉 戊丁酯線粒體肽蛋亞砜還原

 


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