實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴(kuò)增曲線(xiàn)
在Real-time qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線(xiàn)，即為擴(kuò)增曲線(xiàn)。熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)一般分為基線(xiàn)期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線(xiàn)期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線(xiàn)性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
龐蒂亞克亞硫鹽桿菌微生物/抗γ輻射模式菌株: no沉積物/深海MAR附近淺黃色鈣質(zhì)軟泥，含生物殼體提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 1001生長(zhǎng)條件: 28℃

酮叢毛單胞菌1.生物降解；2.生物催化；3.生物活性物質(zhì)篩選； 4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。模式菌株: no沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃

多殺性巴氏桿菌科研及血清定型模式菌株: no巴氏桿菌病豬提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 56生長(zhǎng)條件: 37

枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0002產(chǎn)肌苷。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 30℃ 真空冷凍干燥法；定期移植法

 -809℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)條件: 37℃，好氧培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注]：培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。提供形式: 凍干管、試管斜面安全等級(jí): 2模式菌株: no 4℃，避光冷藏。

仙臺(tái)鏈霉菌培養(yǎng)基: 12模式菌株: no喜樹(shù)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25 定期移植法

大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 0032遺傳工程提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

鏈霉菌培養(yǎng)基: 0305模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

小單孢菌 真空冷凍干燥法生長(zhǎng)條件: 28℃提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 38

 S479致病菌檢測(cè)芯片模式菌株: no種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 51生長(zhǎng)條件: 37℃

 -810℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

大禿馬勃培養(yǎng)基: 0017藥用提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0050苧麻脫膠。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 30℃ 真空冷凍干燥法

相思根瘤菌培養(yǎng)基: 63模式菌株: no根瘤菌提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28-30 定期移植法

類(lèi)產(chǎn)堿假單胞菌培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no死蝗蟲(chóng)體提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

5-乙酰戊  1-溴全己烷  1,1,1,2-四乙烷

2,4-二基鹽  基三硅烷  1,2-二甲基-1,1,2,2-四二硅烷

丁二單甲酯(琥珀單甲酯)  三硅烷  三乙乙基半縮

2-呋喃丙烯  丙基三硅烷  2-

4-NITROTHIOANISOLE  4-硝基茴香硫醚  701-57-5

Titanium tetrachloride  四化鈦  7550-45-0

2-CHLOROETHYL PHENYL SULFIDE  2-乙基硫醚  5535-49-9

CYCLOPROPYL PHENYL SULFIDE  環(huán)丙基硫醚  14633-54-6

大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 ，英文名： Apo-E ELISA Kit

人抗IVIgG抗體ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-IVIgGaibodyELISAKit 96T/48T

大鼠白介素35(IL-35)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 35,IL-35 ELISA Kit

CLIAKitfoGF-Beta(RabbitansformingGrowthfactorBeta)ELISAKit兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β規(guī)格：48T/96T

染色體單體分離分析技術(shù)試劑盒5次

ELISAKitai-RV人抗狂犬病抗體規(guī)格：48T/96T
山羊CYTB基因核酸檢測(cè)試劑盒桑根C80651-76-9英文名：Sanggenone C  

英文別名：Sanggenon C  

登錄號(hào)：80651-76-9

分子式：C40H36O12

分子量：708.21

分子結(jié)構(gòu)：

外觀(guān)：淡黃色粉末

規(guī)格：20mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等

提取來(lái)源：?？?/font>Moraceae, 桑屬M(fèi)orus L植物桑樹(shù)的樹(shù)枝部位

溶解性：難溶于水、正、、二，可溶于、，易溶于乙醇、、二甲基甲酰胺、。

熔點(diǎn)：230-240℃

旋光度：+304°（c0.179，）

藥理藥效：具有降血壓，抑菌，治療心臟病和動(dòng)脈粥樣硬化的作用。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年