PCR的反應(yīng)條件：
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小，設(shè)定25～30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時(shí)，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時(shí), 時(shí)間設(shè)定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時(shí)會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時(shí)，容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外，Extension時(shí)間太短時(shí)，會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時(shí)間太長時(shí)，會出現(xiàn)Smear。
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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鴨種特異性基因核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P10226
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強(qiáng)度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí)，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn)，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR：
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí)，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對數(shù)期），此時(shí)微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定，因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確，重現(xiàn)性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
無乳鏈球菌 蘭氏B群研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 396生長條件: 37

條紋擬盤多毛孢植物病原菌模式菌株: no散尾葵提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃

韓國假單胞菌大洋細(xì)菌模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃

AS3.852產(chǎn)糖化酶。模式菌株: no種屬: Rhizopus│japonicus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28℃

淡紫擬青霉生長條件: 25培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法

蘇云金芽孢桿菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 -135℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

假諾卡氏菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no水中底泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法

毛柄金錢菌(金針菇)培養(yǎng)基: 0017食用菌提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

微桿菌1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選模式菌株: no沉積物/珊瑚砂顆粒提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃

YIM61420模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│sp.植物提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃

展青霉培養(yǎng)基: CM0017產(chǎn)生Griseofulvin灰黃霉素提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥

大腸埃希菌科研及血清定型模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

 -136℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

紅曲霉發(fā)酵，教學(xué) 紅曲菌(Monascus spp．)是我國重要的微生物資源，在我國已有上千年的使用歷史，被廣泛用于食品發(fā)酵劑、食品著色劑和中藥配伍的。由于紅曲菌在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生多種具有活性的代謝產(chǎn)物：如紅曲色素、Monacolin類物質(zhì)、γ-氨基丁以及多種酶類模式菌株: no紅曲米提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃

水生黃桿菌生長條件: 20℃培養(yǎng)基: 848土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no 真空冷凍干燥法

無機(jī)鹽瓊脂培養(yǎng)基250g紡織品防霉性能測試

MUGal(4-甲基傘形酮-β-半乳糖苷)肉湯基礎(chǔ) 100(g) incubation media MUGal(4-甲基傘形酮-β-半乳糖苷)肉湯基礎(chǔ) 100(g)

大腸桿菌&大腸菌群顯色培養(yǎng)基 E.Coli&Coliform Chromogenic Medium 1升 同時(shí)檢測大腸菌群和大腸桿菌，培養(yǎng)24小時(shí)，大腸桿菌顯紫色，大腸菌群顯紅色

改良MC培養(yǎng)基250incubationmedia改良MC培養(yǎng)基250

營養(yǎng)瓊脂 250g 霍亂弧菌傳代培養(yǎng)或純化培養(yǎng)

YM肉湯  YM Broth  250克  BR

土霉素葡萄糖酵母粉瓊脂基礎(chǔ)  OGY Agar  250克  霉菌、酵母菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

華倫斯坦實(shí)驗(yàn)室營養(yǎng)瓊脂  WL Nutrient Agar  250克  啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細(xì)菌的計(jì)數(shù)

沙氏腦心浸液瓊脂  Sabouraud BHI Agar  250克  真菌檢測
鴨種特異性基因核酸檢測試劑盒1%NaCl甘露醇規(guī)格：20支詳情介紹

三糖鐵管規(guī)格：5ml*20支/包用途：用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選

T1N3 肉湯規(guī)格：250g用途：用于霍亂弧菌的生長試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）

CDC厭氧菌瓊脂規(guī)格：250g用途：用于厭氧菌分離培養(yǎng)，使用時(shí)需添加羊血、化血紅素和維生素K1

抗生素檢定培養(yǎng)基1號（PH6.5-6.7）規(guī)格：250g用途：用于藥品抗生素效價(jià)測定

TSA表面接觸皿（6.5cm）規(guī)格：10個(gè)/包用途：用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無菌檢測