PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小，設(shè)定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。
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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛源性成分(Bovine)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P10511
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現(xiàn)性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
十字花科黑脛菌培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26C -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

假交替單胞菌培養(yǎng)基: 471大洋細菌黃褐色沉積物及鉛灰色硫化物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 20℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

 -795℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

大腸埃希菌用于科研模式菌株: no豬臟器提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

大腸埃希菌培養(yǎng)基: CM0051模式菌株: no尿提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 36℃ -80℃冰箱凍結(jié)法

致病性大腸埃希菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法

 NBRC105650=ATCC9642=CBS246.65=NRRL3536=JCM16265培養(yǎng)基: 綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然。模式菌株: no種屬: Aspergillus brasiliensis提供形式: 凍干粉安全等級: 1生長條件: 25，好氧生長特性: @BNCC在CPDA斜面上生長5-7天，產(chǎn)黑色孢子。

金黃色葡萄球菌用于科研模式菌株: no患病奶牛提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

阿德雷島節(jié)桿菌大洋細菌模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 20-25℃

 -796℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

馬鏈球菌馬亞種科研及血清定型模式菌株: no馬頜下腺膿汁提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 396生長條件: 37

假單胞菌培養(yǎng)基: 0002檢測土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 30-37℃ 真空冷凍干燥法

鏈霉菌培養(yǎng)基: 0027代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

灰綠犁頭霉培養(yǎng)基: 0014"-" 菌株提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

鴨疫里氏桿菌培養(yǎng)基: 0科研教學鴨心血安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 37 真空冷凍干燥法;

假交替單胞菌培養(yǎng)基: 471大洋細菌，產(chǎn)酶微生物/ 蛋白酶沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 4-20℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

1,4-二甲基二甲醚  1-氧化二基二氮烯  2,5-二甲氧基-β-硝基

并咪唑-5-甲酯  2,5-二甲氧基-β-硝基  四氫雙環(huán)戊二烯

2,6-二溴  四氫雙環(huán)戊二烯  六甲基乙烷

反式-1,4-環(huán)已烷二  叔丁基二甲硅烷基

Nickelous oxide  氧化鎳  1313-99-1

3-Methylthiopropanol  3-甲硫基丙醇  505-10-2

4-BROMO-3-FLUOROANISOLE  4-溴-3-甲醚  458-50-4

2-Methyl-1-butanethiol  2-甲基丁硫醇  1878-18-8

大鼠載脂蛋白C2(APOC2)ELISA試劑盒 ，英文名： APOC2 ELISA Kit

Mouse phospho exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 小鼠磷化外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人絲狀血球凝集素規(guī)格：48T/96T

/組織高粘性多聚賴氨載玻片制備試劑盒5次(50至100片)

ELISAKitMMP-7大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7規(guī)格：48T/96T
牛源性成分(Bovine)核酸檢測試劑盒β-胡蘿卜素7235-40-7中文別名：β-葉紅素  

英文名：β-Carotene  

登錄號：7235-40-7

分子式：C40H56

分子量：536.44

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：深紅色或暗紅色、有光澤的斜方六面體或結(jié)晶狀粉末

規(guī)格：20mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：胡蘿卜等

溶解性：溶于、。不溶于水、丙二醇、甘油，幾乎不溶于和乙醇。

熔點：183℃

藥理藥效：1.作為維生素A源 其安全性高于維生素A。2.抗氧化 具有猝滅氧自由基，結(jié)合活性氧自由基，形成非自由基化合物的能力。3.預防心血管疾病。4.保護DNA 能防止DNA發(fā)生損傷，并有促進修復損傷的能力。5.抑制腫瘤。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年