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漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-05-11 10:57:43瀏覽次數(shù):153次

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漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P10509
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR:
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),此時(shí)微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
 NBRC13700=ATCC10248生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 104種屬: Burkholderiagladioli安全等級: 1模式菌株: no

 -788℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

彼爾姆海旋菌潛在的無機(jī)污染物降解菌/分離自六價(jià)鉻富集菌群模式菌株: no沉積物/TVG鈣質(zhì)軟泥提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃

大腸埃希菌研究教學(xué)分類模式菌株: no腸道內(nèi)容物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0002菌粉。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法

肺炎克雷伯氏菌培養(yǎng)基: 53模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

太平洋硫膨大桿菌培養(yǎng)基: 471生物轉(zhuǎn)化微生物/分離自硫鹽還原菌菌群水樣/近海海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

亞德食烷菌有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 1001生長條件: 25℃

 -789℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

DSM40573=ATCC27472=CBS769.72=CUB387=IFO1模式菌株模式菌株: yes種屬: Streptomyces│thermodiastaticus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃

嗜肺巴氏桿菌用于科研模式菌株: no兔肝臟病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 56生長條件: 37

雞腿菇(毛頭鬼傘)生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no

鮑曼/醋鈣復(fù)合不動桿菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法

棒狀鏈霉菌培養(yǎng)基: CM0012產(chǎn)生Clavulanic acid(克拉維)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 26-28C 真空冷凍干燥

彼爾姆短桿菌培養(yǎng)基: 471系物降解菌,可用于生物修復(fù)。水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 -790℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

四硼亞硝  -氧化吡烯  三乙基膦

2,6-二溴  三乙基膦  三(五基)膦

3--2,5-二  三(五基)膦  炔丙基三基溴化膦

3,4-二甲酰  炔丙基三基溴化膦  三丁基膦

NUTRIENT BROTH NO. 4, FOR MICROBIOLOGY  營養(yǎng)肉湯

TTC Nutrient Agar  TTC營養(yǎng)瓊脂

LB Broth (Lennox)  LB肉湯

NZCYM BROTH  營養(yǎng)瓊脂

大鼠載脂蛋白B48(Apo B48)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo B48 ELISA Kit

人可溶性白分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA檢測試劑盒HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 96T/48T

大鼠白介素2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)免疫試劑盒 Rat soluble ierleukin-2 receptor,sIL-2Rβ ELISA kit

CLIAKitfoG(MouseThyroglobulin)ELISAKit小鼠甲狀腺球蛋白規(guī)格:48T/96T

人體BRCA-1基因甲基化檢測試劑盒20次

ELISAKitai-CMVIgM人抗巨病抗體IgM規(guī)格:48T/96T
漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測試劑盒白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ73069-13-3中文別名:蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅰ  

英文名:Atractylenolide I  

登錄號:73069-13-3

分子式:C15H18O2

分子量:230.13

分子結(jié)構(gòu):

外觀:白色針狀結(jié)晶

規(guī)格:20mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來源:蒼術(shù)

熔點(diǎn):108-110℃(-)

藥理藥效:白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ能促進(jìn)胃腸道消化吸收功能,是白術(shù)鍵脾的有效成分之-.具有抗炎、抗腫瘤作用,該成分還具有調(diào)節(jié)胃腸道功能和促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收的功能。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
PCR的反應(yīng)條件:
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小,設(shè)定25~30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴(kuò)增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時(shí),每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時(shí), 時(shí)間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時(shí)會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時(shí),容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外,Extension時(shí)間太短時(shí),會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時(shí)間太長時(shí),會出現(xiàn)Smear。

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