DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63278

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規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63278
商品介紹：

測定意義

AsA作為植物細胞一個重要生理指標，其AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關酶類活性的變化涉及植物對一系列環(huán)境脅迫的響應。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物體內，與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng)，具有電子受體的作用。

測定原理：

DTT還原DHA生成AsA，通過測定體系中AsA的生成速率，即可計算出DHA含量。

自備儀器和用品：

低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
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粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

胸苷激1熒光Cy3標記豬IgGThymidine Kinase 1

N-6-腺特異性DNA甲基轉移1熒光Cy3標記水貂IgGN-6-Adenine Specific DNA Methyltransferase 1

抗壞血過氧化物熒光Cy3標記兔IgMAscorbate peroxidase

β-1,3-葡聚糖熒光Cy3標記大鼠IgMβ-1,3 glucanase

丁型肝炎IgM抗體熒光Cy3標記重組白介-1受體拮抗劑Hepatitis D virus IgM

白細胞介36α熒光Cy3標記血藍蛋白Interleukin 36α

白細胞介36β熒光Cy3標記雞卵白蛋白Interleukin 36β

血管內皮生長因子受體2熒光Cy3標記血白蛋白Vascular endothelial cell growth factor receptor 2

肌漿;內質網鈣ATP熒光Cy3標記胰糜蛋白SERCA ATPase

細胞色P4503A4Alexa Fluor 555標記羊IgG(流式同型對照)Cytochrome P4503A4

糖基轉移Alexa Fluor 555標記大鼠IgG(流式同型對照)Glycosyl Transferases

腦啡肽熒光PE-Cy7標記兔IgG(流式同型對照)enkephalin

抗肌炎抗體譜3抗體IgG辣根過氧化物標記生物MSA3-IgG antibody

心型脂肪結合蛋白(親和純化) 牛IgGheart fatty acid binding protein

半胱蛋白抑制劑;胱抑C熒光標記牛血清白蛋白Cystatin C
DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法鹽分析標準品(R)-(-)-N,N-二甲基-1-(2-聯(lián)膦基）二茂鐵乙 97%Anti-EXPB-2/FITC 熒光標記植物延展-βIgG

鹽 BP2007,藥用級(1R,2R)-二[(2-甲氧基基)基磷]乙烷 97%Anti-Ezrin/Radixin/FITC 熒光標記埃茲蛋白抗體IgG

葡聚糖40 分子量40000(R)-(+)-2,2'-聯(lián)[二-(4-基)膦基]-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG

5'-腺核苷二鈉鹽 99%(R)-(+)-2,2'-二(二-3,5-基膦)-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG

腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%rac-2-(二叔丁基膦)-1,1′-聯(lián)萘 98%Anti-Fabp2 /FITC 熒光標記脂肪結合蛋白2抗體IgG

腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%，用于培養(yǎng)(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-雙(二基膦基)二茂鐵基]乙 98%Anti-FABP(brain)/FITC 熒光標記腦型脂肪結合蛋白抗體IgG

核苷5’-一磷腺苷鈉鹽 99%(R)-(+)-2-[2-(二基膦)基]-4-異基二惡唑 98%Anti-factor V/FITC 熒光標記5抗體IgG

抑肽 3-8 TIU/mg(R)-(+)-1,1'-(二基膦基)烷 98%Anti-factor VIII/FITC 熒光標記第八因子相關抗原抗體IgG

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