當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T人TBP基因核酸檢測試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
人TBP基因核酸檢測試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P10215 |
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
不動桿菌培養(yǎng)基: 471近海細(xì)菌沉積物/表層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 20-25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
球孢白僵菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no蟲體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
HBUM82521模式菌株: no安全等級: 1種屬: Micromonospora│auratinigra土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃
木霉屬培養(yǎng)基: CM0014抑制鐮刀菌生長。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法
易變?nèi)墙湍干L條件: 20℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
大腸埃希菌科研及血清定型模式菌株: no腹瀉犢牛提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
-119℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
結(jié)核分枝桿菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0125提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 3模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法
威尼斯不動桿菌培養(yǎng)基: 745有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌;生物活性微生物/產(chǎn)表面活性物質(zhì)水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 26℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
大腸埃希菌研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
Z332致病菌檢測芯片模式菌株: no種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
曲霉培養(yǎng)基: 14模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
美澳型核果褐腐病菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no自然發(fā)病果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 22-25 定期移植法
-120℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
舟狀單頂孢培養(yǎng)基: 18模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 0002Hfr,met-λ-; Qβ噬菌體的宿主菌, 質(zhì)粒, 雜交研究用提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
BLB培養(yǎng)基250g雙歧桿菌的分離培養(yǎng)
M-肉湯 M-Broth 干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)
豬膽鹽 Bile salt from pig 25克 BR,65%
需氧-厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶滅菌與消鑒定試驗(yàn)incubationmedia需氧-厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶滅菌與消鑒定試驗(yàn)
HB-PETAuto-IndectionMedium
MH瓊脂 MHA 250克 抗菌素藥物敏感性試驗(yàn)
M湯 MHB 250克 抗菌素藥物敏感性試驗(yàn)
抗生素1號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6) Antibiotic Agar 250克 磺卞青霉素等的效價(jià)測定
抗生素1號培養(yǎng)基(PH7.8-8.0) Antibiotic Agar 250克 鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素、克拉霉素、妥布霉素、阿米卡星紅霉素、阿奇霉素等效價(jià)測定
人TBP基因核酸檢測試劑盒TM 抑菌劑規(guī)格:用途:作為HB7039TM培養(yǎng)基的添加劑使用。
HBI O157菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:5條/盒用途:用于大腸桿菌0157:H7/NM生化鑒定
維生素K1規(guī)格:1ml詳情介紹
戊脒規(guī)格:50mg用途:加入戊脒多粘菌素瓊脂
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:藥品細(xì)菌培養(yǎng),滴眼劑金黃色葡萄球菌培養(yǎng)等
抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅴ規(guī)格:BR250g詳情介紹
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