當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T轉(zhuǎn)基因大豆MON87708品系核酸檢測試劑盒
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
轉(zhuǎn)基因大豆MON87708品系核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10536 |
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
秦氏蜜環(huán)菌 定期移植法生長條件: 24提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14
絨邊膠盤孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no紅樹提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
肉梭菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0121提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
-850℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
黑曲霉培養(yǎng)基: CM0855甘蔗糖蜜淺盤發(fā)酵產(chǎn)檸檬。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;团囵B(yǎng)基: 14模式菌株: no富士蘋果1年生枝條新病?組織分離菌株提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
小單孢菌屬抗細(xì)菌;抗金黃色葡萄球菌;抗枯草芽孢桿菌模式菌株: no樹林土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C
短小芽胞桿菌海洋細(xì)菌多樣性研究模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 511生長條件: 28℃
鼠傷寒沙門氏菌用于科研模式菌株: no冷凍食品提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
泊庫島食烷菌有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃
-851℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
曲霉屬活性物質(zhì);抗炎模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 0032遺傳研究提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
ivcas7.00644模式菌株: no安全等級: 2種屬: Bacillus│cereus土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃
圍小叢殼菌抗金黃色葡萄球菌模式菌株: no葉提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 1培養(yǎng)基: MEA生長條件: 25C
水叢毛單胞菌培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no底泥提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
2-芐基 N-((1S,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethyl)methanesulfonamide N-基咔唑
三代甲磺鈣鹽 (1R,2R)-(+)-N,N'-二甲基-1,2-雙[3-(三醚甲基)-1,2-乙烷二胺 雙[2-(2-并噻唑基)酚]鋅
2-溴-5-甲氧基 (1R,2R)-(+)-1,2-二(4-甲氧基基)- 四(8-羥基)硼鋰
環(huán)十五內(nèi)酯 (1S,2S)-(-)-1,2-二(4-甲氧基基)- 四(2-甲基-8-羥基)硼鋰
Decabromodiphenyl oxide 十溴二醚 1163-19-5
4-Chloroanisole 4-甲醚 623-12-1
3-Chloroanisole 間甲醚 2845-89-8
2-HYDROXYETHYL BENZYL SULFIDE 2-羥基乙基甲基硫醚 26524-88-9
大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)ELISA試劑盒 ,英文名: TN-C ELISA Kit
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA檢測試劑盒Humanhiston-H2bELISAKit 96T/48T
大鼠白介素7受體(IL-7R)免疫試劑盒 Rat Ierleukin-7 receptor,IL-7R ELISA kit
CLIAKitfoGFBeta2(HumanansforminggrowthfactorsBeta2)ELISAKit人轉(zhuǎn)化生長因子β2規(guī)格:48T/96T
全組織色素C氧化酶活性染色試劑盒10次
ELISAKitASO人抗鏈球菌溶血素O/抗O規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)基因大豆MON87708品系核酸檢測試劑盒升麻素苷80681-45-4中文別名:升麻苷
英文名:Prim-O-glucosylcimifugin
登錄號:80681-45-4
分子式:C22H28O11
分子量:468.45
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:升麻(Cimicifnga foetida L.)根莖
溶解性:易溶于、乙醇、水。
熔點(diǎn):132-133℃
藥理藥效:具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集等多種功效。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
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