當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> P-糖蛋白和BCRP抑制劑(Elacridar)
貨號 | FS-X10461 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Elacridar 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg Elacridar是一種有效的P-糖蛋白(P-glycoprotein)和BCRP的抑制劑,常用于癌癥研究。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:143664-11-3 別名:GF120918;GW0918;GG918;GW120918 純度:98.47% 分子量:563.64 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
英文名稱:Elacridar
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號:FS-X10461
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
蘋果鏈格孢急性髓白血病1蛋白抗體Anti-CX3CL1 Antibody中心體蛋白2(CETN2)
Pseudomonas coleopterorum指狀蛋白RET抗體Anti-CXCL1 Antibody中心體蛋白1(CETN1)
蘇云金芽胞桿菌印第安那亞種環(huán)指蛋白39抗體Anti-CX3CL1 Antibody中心體BRCA2相互作用蛋白(CNTROB)
中國臺灣根霉RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體Anti-CUL5 Antibody中心粒外周物質(zhì)1(PCM1)
葡萄座腔菌磷化Raf激抑制蛋白抗體Anti-CXADR Antibody中心粒旁(PCNT)
干草鞘單胞菌肌相關(guān)蛋白1抗體Anti-CXCL1 Antibody中腦星形膠質(zhì)來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(MANF)
Marinobacter excellensRAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體Anti-CXCL10 Antibody中腦核仁蛋白(MIDN)
陰溝腸桿菌溶解亞種RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗體Anti-CXCL10 Antibody中間絲蛋白(SYNC)
淡紫擬青霉松弛3抗體Anti-CXCL12 Antibody中間密度脂蛋白(IDL)
葉片微桿菌類風(fēng)濕因子抗體Anti-CXCL10 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)
黑靈芝視網(wǎng)膜色上皮特異性蛋白65抗體Anti-CXCL12 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H4(ITIH4)
釀酒酵母RhoB蛋白抗體Anti-CXCL12 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H3(ITIH3)
穿孔艾美耳球蟲G蛋白偶聯(lián)受體135/松弛受體3抗體Anti-CXCL16 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H2(ITIH2)
葡萄座腔菌絲蛋白激1抗體Anti-CXCL13 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)
陰溝腸桿菌環(huán)指蛋白41抗體Anti-CXCL13 Antibody(PB0726)質(zhì)膜膜泡關(guān)聯(lián)蛋白(PLVAP)
島生異擔(dān)子菌核基質(zhì)蛋白21抗體Anti-CXCL2 Antibody酯D(ESD)
曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
40183=ATCC23968=CBS951.68=IFO12920=INA資源名稱: 淺紫鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:0.98
P-糖蛋白和BCRP抑制劑(Elacridar)交鏈孢 1-甲基-3-CD38分子
白腐墊殼孢 異啉鹽鹽雄結(jié)合受體
淤泥假單胞 乙酰酮(降二烯)合銠補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9
異常漢遜酵母 固紅紫LB鹽賴氨酰氧化同系物2
貝倫格葡萄座腔梨生?;?/span> 2-萘賴氨酰氧化同系物1
棉子糖腸球 7-溴-3,4-二氫萘-1(2H)-酮賴氨酰氧化同系物4
黃曲霉 3-環(huán)基-3-氧代甲酯白三烯
胡椒枯萎病 鈣三半乳糖
短波單胞屬 正丁基二(1-金剛烷基)膦血小板反應(yīng)蛋白4
傘枝犁頭霉 N -乙酰- D- 乳糖連接黏附分子-A
黃褐紋白蟻傘 叔丁鎂α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白
乳明串珠 1,3-苯并噻唑-2-羧乙酯磷化組蛋白
串珠鐮孢* 3,4-二氟三氟甲苯磷化組蛋白3
白僵 4-溴-2-氟-1-抑絲蛋白1
新疆斯克爾曼氏 4-氟鄰苯二甲乳脫氫
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