當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T禽傳染性法氏囊病毒(IBDV)核酸檢測試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
禽傳染性法氏囊病毒(IBDV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10260 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
-205℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
魯氏不動桿菌培養(yǎng)基: 820模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 20℃ 真空冷凍干燥法
甲型副傷寒沙門氏菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
分散泛菌培養(yǎng)基: 820模式菌株: no沙漠提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
牡丹枝孢(牡丹葉霉病菌)生長條件: 20℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077面包酵母。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
副凝聚短狀桿菌無機(jī)污染物抗性菌/抗重金屬鉻(Cr)模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 4℃
-206℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
小孢葉點(diǎn)菌植物病原物,為該病防治提供依據(jù)模式菌株: no木瓜葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 25
黑曲霉生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 134提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法;其他
新洋蔥伯克霍爾德氏菌培養(yǎng)基: 2能降解有大分子有機(jī)物,用于環(huán)境治理提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0350檢定菌提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37C 真空冷凍干燥
三隔鐮刀菌培養(yǎng)基: 14植物病原物,用于該菌種群遺傳學(xué)研究朽木提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 25 定期移植法
鏈孢囊菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 38提供形式: 凍干物模式菌株: yes分類學(xué)、及普通環(huán)境微生物的研究 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-207℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
大腸埃希氏菌DH5a/pBAD-MyC-HisC/PasecA N236H培養(yǎng)基: CM0033保存表達(dá)綠膿桿菌SecA蛋白N端236aa基因的基因工程細(xì)菌提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37C 液氮超低溫凍結(jié)
AntibioticAgarNO.2
MMO-MUG 100(g) incubation media MMO-MUG 100(g)
酵母提取物瓊脂 Yeast Extract Agar 250克 水中細(xì)菌總數(shù)的檢測
快速硫化氫(H2S)試驗瓊脂250彎曲桿菌的硫化氫試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia快速硫化氫(H2S)試驗瓊脂250彎曲桿菌的硫化氫試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))
SodiumChlorideVioletpurpleEnrichmentBroth
改良V-P培養(yǎng)基 V-P Medium Modified 250克 蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗
R2A瓊脂 R-2A Agar 250克 飲用水中導(dǎo)生細(xì)菌分離培養(yǎng)
A1培養(yǎng)基 A1 Medium 250克 檢測水中的大腸菌群
酵母提取物瓊脂 Yeast Extract Agar 250克 水中細(xì)菌總數(shù)的檢測
禽傳染性法氏囊病毒(IBDV)核酸檢測試劑盒Mueller-Hinton瓊脂(MHA)規(guī)格:250g用途:用于彎曲桿菌的藥物敏感性試驗
抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅱ(PH7.8-8.0)規(guī)格:BR250g詳情介紹
Andrade指示劑規(guī)格:100ml詳情介紹
Letheen肉湯規(guī)格:250g用途:用于化妝品中微生物檢測
磷鹽緩沖液(PH7.2)規(guī)格:250g用途:用于樣品的稀釋(GB標(biāo)準(zhǔn))
副溶血性弧菌瓊脂規(guī)格:250g用途:用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
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