當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T禽白血病病毒J型(ALV-J)核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
禽白血病病毒J型(ALV-J)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10256 |
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
木霉生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法
-196℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
鏈格孢培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no植物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 18-26℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
ATCC15840=CBS356.67=CCRC11616=DSM43033=IFO12模式菌株模式菌株: yes種屬: Streptomyces│cinereus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0039生長條件: 28℃
鞘氨醇單胞菌生長條件: 4℃培養(yǎng)基: 848土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no 真空冷凍干燥法
結(jié)核分枝桿菌生長條件: 37℃研究提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法
嗜水氣單胞菌培養(yǎng)基: 33共生微生物/魚類腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/半乳糖苷酶生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
炭疽芽孢桿菌科研及血清定型模式菌株: no炭疽牛提供形式: 凍干物安全等級: 3培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
-197℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
蘇云金芽胞桿菌培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no1-5cm土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
巴氏醋桿菌培養(yǎng)基: CM0745釀造食醋。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
黑曲霉培養(yǎng)基: CM0013產(chǎn)檸檬。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 35℃ 礦物油法
海假交替單胞菌培養(yǎng)基: 471微生物/耐冷菌;產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶水樣/海冰提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
邊緣假單胞菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
纖維單胞菌培養(yǎng)基: 848模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 20℃ 真空冷凍干燥法
-198℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
Nutrientagarslant
ModifiedFreyMedium
伊紅美藍(lán)瓊脂 (EMB) Eosin-Methylene Blue Agar 250 弱選擇性培養(yǎng)基、分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌(SN標(biāo)準(zhǔn))
incubationmedia
PotatoDextroseAgar
假單胞F瓊脂 Pseudomonas Agar F 250克 銅綠(綠膿)假單胞菌色素生成試驗
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 Dulcitol Semisolid Agar 10克 細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗
瓊脂 NO.4 Agar Base 250克 霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng)
我妻氏血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) Wagstsuma Agar Base 250克 副溶血性弧菌的溶血試驗
禽白血病病毒J型(ALV-J)核酸檢測試劑盒氨基脫羧酶對照規(guī)格:1ml*20用途:用于生化鑒定
解磷細(xì)菌培養(yǎng)基(有機磷細(xì)菌培養(yǎng)基)規(guī)格:250g用途:用于利用有機磷細(xì)菌的分離培養(yǎng)
賴氨脫羧酶培養(yǎng)基規(guī)格:5g用途:生化培養(yǎng)基,賴氨脫羧酶試驗
阿奇霉素藥敏紙片規(guī)格:15μg/片,20片/瓶用途:用于藥物體外敏感性試驗
醋鹽瓊脂規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌醋鹽試驗
BCYE-Cys瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:可溶性焦磷鐵用途:0.025g每支含量
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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