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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> NiR亞硝酸還原酶檢測(cè)試劑盒可見分光光度法
貨號(hào) | FS-01S63367 |
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商品介紹:
測(cè)定意義 硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內(nèi),是自然界氮循環(huán)過(guò)程中的關(guān)鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3,從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。 測(cè)定原理 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品 天平、研缽、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:NiR亞硝酸還原酶檢測(cè)試劑盒可見分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
檢測(cè)方法:可見分光光度法
貨號(hào):FS-01S63367
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。 |
豚鼠胰腺癌標(biāo)志物(CA242)試劑盒Anti-MAdCAM1 Antibody血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體
豚鼠血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒 Anti-MAFA Antibody血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B167
豚鼠白分化抗原CD109(CD109)試劑盒 Anti-MAF Antibody血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B
豚鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子受體α(PDGFRα)試劑盒Anti-MAFA Antibody01群稻葉型霍亂弧菌抗體
豚鼠胱天蛋白9(P9)試劑盒 Anti-MAG Antibody血管抑制蛋白1抗體
豚鼠II型前膠原基端原肽(PIINP)試劑盒Anti-MAG AntibodyV5 tag標(biāo)簽抗體
豚鼠蛋白激活受體3(PAR3)試劑盒Anti-MAK AntibodyVSV-G tag標(biāo)簽抗體
豚鼠成纖維生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(FGFBP1)試劑盒Anti-MAG Antibody血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體
豚鼠核孔蛋白98kda(NUP98)試劑盒Anti-MAOA Antibody腺苷環(huán)化激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體
豚鼠三葉因子2(TFF2)試劑盒Anti-MALT1 Antibody囊泡對(duì)接蛋白p115抗體
豚鼠粒趨化蛋白2(GCP-2)試劑盒Anti-MAOB Antibody血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A
豚鼠層粘蛋白(LN)試劑盒Anti-MAOA Antibody(PB0704)小鼠抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A抗體
豚鼠滑行蛋白β(TXLNb)試劑盒Anti-MAP2 Antibody粘著斑蛋白抗體
豚鼠皮膚T相關(guān)抗原(CLA/CTAGE)試劑盒 Anti-MAOB Antibody(PB0705)嗜鉻顆粒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體
豚鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒Anti-MAP1LC3A AntibodyD結(jié)合蛋白抗體
NiR亞硝酸還原酶檢測(cè)試劑盒可見分光光度法粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA Kit人脾臟酪激(Syk)ELISA試劑盒,
CWF19L1蛋白抗體Human TRXR3(Thioredoxin reductase 3) ELISA Kit人血管緊張Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒,
心動(dòng)加速蛋白多肽抗體Human GRIA1(Glutamate receptor 1) ELISA Kit人富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒,
通道相互作用蛋白3抗體Human NT-proCNP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) ELISA Kit小鼠白介15(IL-15)ELISA試劑盒,
12號(hào)染色體開放閱讀框29抗體Human NAC-alpha(Nascent polypeptide-associated complex subunit alpha) ELISA Kit小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒,
12號(hào)染色體開放閱讀框49抗體Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) ELISA Kit小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒,
12號(hào)染色體開放閱讀框50抗體Human TRXR3(Thioredoxin reductase 3) ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒,
12號(hào)染色體開放閱讀框53抗體Human NT-proCNP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) ELISA Kit小鼠游離狀腺原(Free-T3)ELISA試劑盒,
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