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貨號 | FS-01S63507 |
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產(chǎn)品名稱:酸性蛋白酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63507
商品介紹:
測定意義 ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。 測定原理: 酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生氨酸;在堿性條件下,氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;鎢藍在680nm有特征吸收峰,通過測定其吸光度增加,來計算ACP活性。 自備儀器和樣品: 水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
綿羊CCAAT增強子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)聯(lián)免疫試劑盒 鮑姆木層孔Mouse HC II (Heparin Cofactor II) ELISA Kit
綿羊二肽基肽IV (DPP4)聯(lián)免疫試劑盒根霉Mouse HB-EGF (Heparin-binding Epidermal Growth Factor-like Growth Factor) ELISA Kit
綿羊Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)聯(lián)免疫試劑盒假單胞屬Mouse LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit
綿羊甲狀腺球蛋白(TG)聯(lián)免疫試劑盒瓦尼針層孔Mouse HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit
綿羊Rho GDP解離抑制因子α(ARHGDIα)聯(lián)免疫試劑盒冷溫木拉克酵母Mouse HNF1a (Hepatocyte Nuclear Factor 1 Alpha) ELISA Kit
綿羊胃蛋白原C(PGC)聯(lián)免疫試劑盒放射形根瘤Mouse HNF1b (Hepatocyte Nuclear Factor 1 Beta) ELISA Kit
綿羊基質(zhì)衍生因子4(SDF-4)聯(lián)免疫試劑盒芬尼青霉Mouse HNF4a (Hepatocyte Nuclear Factor 4 Alpha) ELISA Kit
綿羊轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)聯(lián)免疫試劑盒棒曲霉Mouse HNF6a (Hepatocyte Nuclear Factor 6 Alpha) ELISA Kit
綿羊葡萄糖-6-磷脫氫(G6PD)聯(lián)免疫試劑盒雅致放射毛霉Mouse HNF6b (Hepatocyte Nuclear Factor 6 Beta) ELISA Kit
綿羊激肽釋放7(KLK7)聯(lián)免疫試劑盒 大豆慢生根瘤Mouse HDGF (Hepatoma Derived Growth Factor)ELISA Kit
綿羊凝血受體(TR)聯(lián)免疫試劑盒枝孢霉Mouse Hepc (Hepcidin) ELISA Kit
綿羊Ras-GTP激活蛋白1(Ras-GAP1)聯(lián)免疫試劑盒貪噬屬Mouse HNRPA1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A1) ELISA Kit
綿羊趨化樣因子超家族成員7(CKLFSF7)聯(lián)免疫試劑盒卷枝毛霉Mouse HK1 (Hexokinase 1) ELISA Kit
綿羊B因子(BF)聯(lián)免疫試劑盒 黃色短桿*Mouse HK (Hexokinase) ELISA Kit
綿羊核糖體蛋白S6激β1(RPS6Kβ1)聯(lián)免疫試劑盒解淀粉芽孢桿Mouse HMGB-1 (High mobility group protein B1) ELISA Kit
酸性蛋白酶檢測試劑盒微量法原鈣粘蛋白β4抗體Anti-CCL4 AntibodyEPI400 電擊感受態(tài)50ul*20哪里有買
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