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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T雞滑液囊支原體(MS)核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
雞滑液囊支原體(MS)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10248 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
檸檬明串珠菌奶、奶酪輔發(fā)酵劑模式菌株: no原料乳提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 30℃
季氏畢赤酵母培養(yǎng)基: 436模式菌株: no紅提提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
鏈格孢霉屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
黃色海假單胞菌污染物降解微生物/潛在石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 15℃
CBS600.73=IFO9704模式菌株模式菌株: yes種屬: Eupenicillium│cinnamopurpureum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25℃
-176℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
鹽擬諾卡氏菌培養(yǎng)基: 1003生物活性微生物/潛在的抗腫瘤活性沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
解淀粉芽孢桿菌培養(yǎng)基: 0002核內(nèi)切酶BamHI提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
肺形側(cè)耳培養(yǎng)基: 150模式菌株: yes與隆緣桉共生提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 25 定期移植法
流產(chǎn)布魯氏菌作為獸用的滅活疫苗菌株模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 401生長條件: 37
木荷迪茨氏菌培養(yǎng)基: 471大洋細(xì)菌水樣/表層海水(0-5m)提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。模式菌株: no盾葉雞蛋花根際土壤1-2cm處提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃
-177℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
JCM10272=ATCC700843=DSM15395=BCRC80020=CIP105983=IFO16685=NBRC16685模式菌株模式菌株: yes種屬: Roseivivaxhalodurans疊層石上的輪藻安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 168生長條件: 28℃
托姆青霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
ATCC6538模式菌株: no安全等級(jí): 2種屬: Staphylococcus aureus subsp. aureus RosenbachHuman lesion提供形式: 西林瓶,菌片培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g(液體培養(yǎng)基不含),蒸餾水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。生長條件: 37℃,好氧
3%酶試劑2ml*20支細(xì)菌的酶試驗(yàn)
MRS瓊脂 MRS Agar Base 食品中乳菌總數(shù)測定
XLD瓊脂培養(yǎng)基 Xylose Lysine Desoxycholate Medium 100克 分離志賀氏菌屬和沙門氏菌
胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶布魯氏菌屬檢驗(yàn)incubationmedia胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶布魯氏菌屬檢驗(yàn)
BileEsculinAgar
改良磷鹽緩沖液 PSB 250克 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌冷增菌培養(yǎng)
耶爾森氏菌選擇性瓊脂 CIN Agar 250克 分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
改良Y培養(yǎng)基 Y Medium Modified 250克 分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
TTC肉湯 ITC Broth 250克 分離培養(yǎng)耶爾森氏菌
雞滑液囊支原體(MS)核酸檢測試劑盒頭孢哌/舒巴坦藥敏紙片規(guī)格:75/30μg/片,20片/瓶用途:用于抗菌藥體外敏感試驗(yàn)。
可溶性焦磷鐵規(guī)格:0.025/支*5用途:每支添加于100mlHB8493或100mlHB8493-1中
SCDLP液體培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹
支原體半流培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于支原體的培養(yǎng)
品紅亞硫鈉瓊脂規(guī)格:250g用途:用于飲用水,水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證(GB標(biāo)準(zhǔn))
季銨鹽類中和劑管規(guī)格:9ml*20/盒用途:主要用于含有季銨鹽類消劑樣品的增菌培養(yǎng)
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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