實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
黃孢原毛平革菌培養(yǎng)基: CM0017分解木質(zhì)素。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28-32℃ 真空冷凍干燥法

#擬雙輪絲鏈輪絲菌益生菌模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 30

 -171℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

大腸埃希菌培養(yǎng)基: CM0051模式菌株: no痰提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2生長(zhǎng)條件: 36℃ -80℃冰箱凍結(jié)法

釀酒酵母生長(zhǎng)條件: 25℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

鏈霉菌屬菌種抗金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌11、腸球菌模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C

豬霍亂沙門(mén)氏菌研究模式菌株: no病豬提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37

季氏畢赤酵母培養(yǎng)基: 436模式菌株: no黑堿土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

涅斯特連科氏菌培養(yǎng)基: 331模式菌株: no鹽堿土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

 -172℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

 HBUM74223模式菌株: no安全等級(jí): 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0305生長(zhǎng)條件: 28℃

釀酒酵母發(fā)酵制面包。模式菌株: no老面酵頭提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃

死谷芽孢桿菌潛在的生物活性微生物/軟珊瑚共附生菌，用于篩選活性物質(zhì)產(chǎn)生菌 ；產(chǎn)酶微生物/淀粉酶，蛋白酶，脂酶（三丁甘油酯）模式菌株: no生物樣/軟珊瑚提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃

釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077以糖蜜為原料發(fā)酵制酒精。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法

巴氏醋桿菌培養(yǎng)基: CM0001釀造食醋。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 30℃ 真空冷凍干燥法；定期移植法

球孢白僵菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no蟲(chóng)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25 定期移植法

L-半胱鹽鹽0.04g/支*5添加于BCYE瓊脂基礎(chǔ)或99ml的IronAgar中

MR-VP broth Methylred-VOGES-PROSKAUER broth MR-VP肉湯/甲基紅 VOGES-PROSKAUER肉湯 1.05712.0500 MERCK默克 incubation media MR-VP broth Methylred-VOGES-PROSKAUER broth MR-VP肉湯/甲基紅 VOGES-PROSKAUER肉湯 1.05712.0500 MERCK默克

乳桿菌肉湯培養(yǎng)基 250g 維生素檢測(cè)菌種的培養(yǎng)基

Wistar大鼠脂肪間質(zhì)干*培養(yǎng)基Wistarratadiposemesenchymalstemcellsculturemedium

MUGNutrientAgar

結(jié)晶紫增菌液  Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth  250克  副溶血弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)

蔗糖瓊脂  Sodium Chloride Sucrose Agar  250克  副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)

嗜鹽菌選擇性瓊脂  Halophilic Bacteria Selective Agar  250克  副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)

3.5%三糖鐵瓊脂  3.5% NaC1 TSI Agar  250克  副溶血弧菌生化試驗(yàn)鑒別
呼吸道24種病原體核酸檢測(cè)試劑盒MMO-MUG培養(yǎng)基規(guī)格：100g用途：用于生活飲用水及其水源水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的同時(shí)檢測(cè)

阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基（DFI瓊脂）規(guī)格：1000ml用途：用于阪崎桿菌的顯色培養(yǎng)，阪崎桿菌顯藍(lán)色，其它腸桿菌顯無(wú)色。

萘啶（9mg）規(guī)格：1ml/支*5用途：每支添加于225ml HB4186中

化鈉結(jié)晶紫增菌液規(guī)格：250g用途：用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

鼠李糖發(fā)酵管規(guī)格：20支用途：用于單增李氏菌生化鑒定

磷鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基規(guī)格：BR250g詳情介紹