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狐貍源性成分(Vulpes)核酸檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-11 16:33:02瀏覽次數(shù):122次

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狐貍源性成分(Vulpes)核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:狐貍源性成分(Vulpes)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P10527
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0013用于酒精。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法

ATCC49919=CIP106990=DSM420=KCTC9902=LMG16253=NBRC15511模式菌株模式菌株: yes種屬: Arthrobacter│nicotinovorans提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃

秋楓擲孢酵母生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

枝芽胞桿菌培養(yǎng)基: 471大洋細菌沉積物/深海沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 4-20℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

慢生大豆根瘤菌培養(yǎng)基: 0053可用于根瘤菌菌劑提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法;礦物油法

 -832℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

黃曲霉培養(yǎng)基: 0015產(chǎn)生果膠酶提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

CBS792=IFO0794培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no種屬: Debaryomyces│hansenii var. fabryi提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

黃海鞘氨醇盒菌培養(yǎng)基: 471微生物/耐冷菌沉積物/表層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

ATCC15521模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Lactobacillus sakei subsp. sakei清酒自動發(fā)酵劑提供形式: 凍干物培養(yǎng)基質(zhì)控,分類學研究。培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪蛋白胨10.0 g,牛肉提取物10.0 g,酵母提取物5.0 g,葡萄糖5.0 g,乙鈉5.0 g,檸檬二氨2.0 g,吐溫80 1.0 g,K2HPO4 2.0 g,MgSO4·7H2O 0.02g,MnSO4·H2O 0.05 g,CaCO3 20.0 g,蒸餾水1000毫升,pH 6.8。

金黃色葡萄球菌用于科研模式菌株: no患病奶牛提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

大腸埃希菌用于科研模式菌株: no死亡仔豬十二指腸提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

 -833℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

毛殼菌屬活性物質(zhì);抗凝血模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C

球孢白僵菌培養(yǎng)基: 0014昆蟲生物防治提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

米根霉甜酒及小曲酒,糖化淀粉。模式菌株: no大曲提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃

2,5-二溴對二二乙酯  亞磷三乙酯  溴甲基環(huán)己烷

3--2-(2--5-基-氧基)-5-基  乙芐酯  溴甲基環(huán)丁烷

2-溴-5-甲基  二乙二醇丁醚醋酯  右旋香芹

2-丙烯環(huán)己基酯  偶氮二二乙酯  小茴香油

Isobutylene oxide  甲基環(huán)氧丙烷  558-30-5

2,4-DIAMINOANISOLE  二基甲醚  615-05-4

(Trifluoromethoxy)benzene  氧基  456-55-3

2-thiol  2-硫酚  91-60-1

大鼠早老素2(PS2)ELISA試劑盒 ,英文名: PS2 ELISA Kit

Felis parvovirus (FPV) ELISA Kit 貓細小病抗體(FPV)ELISA試劑盒

MouseIerleukin2,IL-2ELISAkit 小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumangelsonELISAKit人凝膠原蛋白規(guī)格:48T/96T

吸煙者人體肺組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

ELISAKitSDF-1a/CXCL12大鼠基質(zhì)衍生因子1a規(guī)格:48T/96T
狐貍源性成分(Vulpes)核酸檢測試劑盒草烏甲素107668-79-1英文名:Bulleyaconitine A  

英文別名:Aconitane, methanone deriv  

登錄號:107668-79-1

分子式:C35H49NO9

分子量:627.76

分子結(jié)構(gòu):

外觀:白色粉末

規(guī)格:20mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等

提取來源:為毛茛科植物北烏頭Aconitumkusnezoffii Reichb.的塊根

溶解性:易溶于乙醇、三、中,在水中不溶;在稀鹽、稀硫中極易溶解。

熔點:160~165℃

藥理藥效:適用于治療癌癥晚期疼痛、風濕及類風濕性關(guān)節(jié)炎、肩周炎、肩臂痛、落枕、骨關(guān)節(jié)炎、良性關(guān)節(jié)痛、腰及四肢關(guān)節(jié)扭傷、挫傷、腰肌勞損及腰背痛、坐骨神經(jīng)痛、肌纖維炎及肋軟骨炎、帶狀皰疹、感冒頭痛、牙痛等。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
PCR的反應條件:
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小,設(shè)定25~30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時,容易發(fā)生非特異性反應。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear。

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