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NR硝酸還原酶檢測試劑盒紫外分光光度法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 13:14:55瀏覽次數(shù):92次

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貨號 FS-01S63365
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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:NR硝酸還原酶檢測試劑盒紫外分光光度法

規(guī)格:50管/48樣

檢測方法:紫外分光光度法

貨號:FS-01S63365
商品介紹:

測定意義

NR( EC 1.7.1.3)廣泛存在于植物中,是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶,也是誘導(dǎo)酶,對作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。

測定原理

NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;NADH在 340 nm 有最大吸收峰,通過測定NADH減少速率來表示NR活性。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

豚鼠著絲粒蛋白I(CENPI)試劑盒 Anti-KCNJ16 Antibody色羥化抗體

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豚鼠防御α5(DEFα5)試劑盒Anti-KDR Antibody粘合(固生蛋白)抗體

豚鼠谷胱過氧化物 1(GPX1)試劑盒Anti-KDR Antibody三葉肽因子3抗體

豚鼠血小板相關(guān)球蛋白(PAIg)試劑盒 Anti-KIF15 Antibody組織因子途徑抑制劑-2抗體

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豚鼠甲狀腺受體α(THRα)試劑盒 Anti-KERA Antibody轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體(TGFβ1)

豚鼠胎盤生長因子(PGF)試劑盒Anti-KIBRA/WWC1 Antibody轉(zhuǎn)移生長因子β2抗體(TGFβ2)
NR硝酸還原酶檢測試劑盒紫外分光光度法胰腺α淀粉抗體Human INO80C ELISA Kit人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒,

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human INPP5A ELISA Kit小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒,

磷化非受體酪激c-Abl抗體Human INPP5B ELISA Kit小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒,

磷化活化復(fù)制因子2抗體Human INPP5E ELISA Kit大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒,

固酮還原家族1成員D1抗體Human IGF2BP2(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 2) ELISA Kit大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒,

肝血管生成相關(guān)蛋白抗體Human IMPAD1 ELISA Kit大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)ELISA試劑盒,

自水解結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體Human IGHD ELISA Kit大鼠α谷胱S轉(zhuǎn)移(α-GST)ELISA試劑盒,

?;?/span>A硫酯8Human IMMP2L(Mitochondrial inner membrane protease subunit 2) ELISA Kit大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒,

 


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