當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10286 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
黑曲霉生長條件: 28-30℃培養(yǎng)基: CM0077提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
-228℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
煙色擬盤多毛孢培養(yǎng)基: 16模式菌株: no紅樹提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
根瘤菌(檉麻)與檉麻共生固氮模式菌株: no檉麻根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0053生長條件: 28-30℃
美澳型核果褐腐病菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no自然發(fā)病果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 22-25 定期移植法
蘇云金芽孢桿菌生物殺蟲劑模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃
小單孢菌屬抗細(xì)菌;抗金黃色葡萄球菌;抗枯草芽孢桿菌模式菌株: no樹根土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C
伊氏錐蟲科研及血清定型模式菌株: no水牛血液提供形式: 其他安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
-229℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
施氏假單胞菌培養(yǎng)基: 33生物轉(zhuǎn)化微生物/反硝化菌(單菌驗(yàn)證),可用于生物脫氮研究,去除養(yǎng)殖水體富營養(yǎng)化;產(chǎn)酶微生物/淀粉酶、脂酶(三丁甘油酯)沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
優(yōu)雅食烷菌培養(yǎng)基: 821有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
AS1.16殺鱗翅目昆蟲模式菌株: no種屬: Bacillus thuringiensis Berliner提供形式: 凍干管安全等級: 1培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件: 30℃,好氧。
球孢鏈霉菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0011提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃
柑桔鏈格孢產(chǎn)生真菌素模式菌株: no枯葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 26℃
-230℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
胰胨瓊脂培養(yǎng)基250g魚類細(xì)菌病中病原菌的分離培養(yǎng)
m-HPC Agar incubation media m-HPC Agar
短小芽孢桿菌 支/瓶
SorbitolMaconkeyAgarBase
m-GREENYEASTandFUNGIBROTH
超級肉湯 Super Broth 250克 BR
超級瓊脂 Super Agar 250克 BR
TYGPN培養(yǎng)基 TYGPN Medium 250克 BR
印度墨水 Indian ink 100毫升 炭疽桿菌檢測用配套試劑
偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸檢測試劑盒葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基
麥康凱瓊脂3號規(guī)格:250g用途:用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)
結(jié)晶紫規(guī)格:25g用途:微生物指示劑
酚紅煌綠瓊脂規(guī)格:250g用途:用于飼料中沙門氏菌分離培養(yǎng)
苦杏仁甙規(guī)格:20支詳情介紹
L型細(xì)菌高滲鹽增菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于L型細(xì)菌增菌培養(yǎng)
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。