當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10541 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
-861℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
共頭霉培養(yǎng)基: 0014高糧酒提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
乳乳球菌研究分析模式菌株: no乳汁提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 55生長條件: 37
鏈霉菌分類學(xué)及微生物藥物學(xué)的研究模式菌株: no表面土壤提供形式: 其他安全等級: 1培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃
意大利青霉培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 598提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
枯草芽孢桿菌枯草亞種抑制志賀氏菌,抑制沙門氏菌、抑制梨綠霉病原菌模式菌株: no霍桑葉提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0003生長條件: 35-37℃
-862℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
ivcas7.00338=ATCC14577模式菌株: no安全等級: 1種屬: Lysinibacillus│sphaericus土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃
BCRC10461=ATCC17485=DSM50208=JCM6158=KCTC1642=NCIMB12092模式菌株: no安全等級: 1種屬: Pseudomonas putida土壤提供形式: 凍干粉培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件: 30℃,好氧
玫瑰紫小單孢菌培養(yǎng)基: CM0012產(chǎn)生Rosamycin(薔薇霉素)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 35-37C 真空冷凍干燥
寡養(yǎng)單胞菌培養(yǎng)基: 848模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
焦曲霉用于真菌素研究模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 26℃
極細(xì)鏈格孢菌科學(xué)研究模式菌株: no蒼術(shù)葉片提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃
-863℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
盤多毛孢屬培養(yǎng)基: 14模式菌株: no葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26 定期移植法
4-溴-3-硝基甲醚 育亨賓鹽鹽 2,7-二溴-9-芴
溴化鎳(II)三水合物 秋水仙素 2-溴-9-芴
代二乙酯 2-磺酰 2,7-二溴芴
3,5-二-4-溴 EDTA四鈉 2-溴芴
2-Methoxyethanol 乙二醇甲醚 109-86-4
2-Butoxyethanol 乙二醇丁醚 111-76-2
Benzamidine hydrochloride hydrate 鹽甲脒,水合 206752-36-5
Formamidine acetate 乙甲脒 3473-63-0
大鼠整合素α6(ITGα6)ELISA試劑盒 ,英文名: ITGα6 ELISA Kit
Goat ierleukin 2 receptor (IL-2R) ELISA Kit 山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
MouseIerleukin13,IL-13ELISAKit 小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanGlycatedAlbumin,GAELISAKit人糖化白蛋白規(guī)格:48T/96T
無去垢劑裂解液物理裂解
ELISAKitTPO大鼠甲狀腺過氧化物酶規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒連翹苷487-41-2;96420-61-0中文別名:連翹甙
英文名:Phillyrin
登錄號:487-41-2; 96420-61-0
分子式:C27H34O11
分子量:534.56
分子結(jié)構(gòu):
外觀:無色針晶(-)
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:木犀科植物連翹
溶解性:可溶于的混合溶劑、DMSO等。
熔點:184~185℃
藥理藥效:降血脂、抗氧化作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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