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當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T豬藍耳病毒歐洲株/美洲株核酸檢測試劑盒

豬藍耳病毒歐洲株/美洲株核酸檢測試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-11 16:47:51瀏覽次數(shù):126次

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豬藍耳病毒歐洲株/美洲株核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR的反應(yīng)條件:
因擴增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小,設(shè)定25~30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時,容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear。
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬藍耳病毒歐洲株/美洲株核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P10607
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
 ivcas7.00843培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no種屬: Bacillus│coagulans提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28-32℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

氣微菌(加詞待譯)培養(yǎng)基: 471海洋放線菌沉積物/TVG沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 ivcas7.00730模式菌株: no安全等級: 1種屬: Bacillus│licheniformis土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃

十字花科黑脛菌培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26C -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

大腸埃希菌用于科研模式菌株: no狗脾提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

鹽單胞菌培養(yǎng)基: 471大西洋細(xì)菌水樣/上層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 -903℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

 2730培養(yǎng)基: CM0051模式菌株: no種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法

硫氧化檸檬胞菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法

環(huán)狀芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0002可用于廢水處理提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法

香菇可作香菇種質(zhì)資源保護利用、系統(tǒng)發(fā)育學(xué)和生物地理學(xué)研究。模式菌株: no殼斗科倒木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃

遲緩愛德華氏菌魚類病害的研究模式菌株: no鰻鱺提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 3培養(yǎng)基: 2生長條件: 28℃

唐德鏈霉菌培養(yǎng)基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 -904℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

產(chǎn)氣腸桿菌培養(yǎng)基: CM0051模式菌株: no痰提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 36℃ -80℃冰箱凍結(jié)法

冠霉素鏈霉菌微生物代謝調(diào)控研究模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 39生長條件: 28℃

4-甲基-3-(基)  降龍涎香醚  一頻吶

過氧化(2-乙基己)叔丁酯  四氫-4-甲基-2-(2-甲基-1-丙烯基)-2H-  4,4'-二醚二

5--2-(基)  順式-3-己烯  3-氧代雄甾-4-烯17-β-羧

丁橙花酯  對戊基環(huán)己  鹽吉西他賓

1-Indanamine  1-基茚滿  34698-41-4

D(+)-Galactosamine hydrochloride  D-半乳糖胺鹽鹽  1772-03-8

Pravastatin sodium  普伐他汀鈉  81131-70-6

17alpha-Hydroxy-yohimban-16alpha-carboxylic acid methyl ester  育亨賓  146-48-5

大鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)免疫試劑盒 Human angiotension Ⅱ receptor 1 Aibody,ATⅡR1 Ab ELISA Kit

人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNα-Ab ELISA Kit

RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA試劑盒大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISA試劑盒人糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanKallikrein6,KLK6ELISAKit人激肽釋放酶6(KLK6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬藍耳病毒歐洲株/美洲株核酸檢測試劑盒重樓皂苷III19057-60-4中文別名:薯蕷皂甙; 薯蕷皂苷; 重樓皂甙III  

英文名:Dioscin  

登錄號:19057-60-4

分子式:C45H72O16

分子量:869.05

分子結(jié)構(gòu):

外觀:白色或微黃的結(jié)晶性粉末。

規(guī)格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源:薯蕷科植物穿山龍(Dioscorea nipponica Makino)的根莖

溶解性:不溶于水、、,可溶于、乙醇、醋,微溶于、戊醇。

熔點:204~207℃

旋光度:-115°(C=0.373, 乙醇)

藥理藥效:具有抗炎、抗腫瘤、抗病、降低膽固醇、降低血壓、殺軟體動物、抗生育等功效。可用于氣管炎的治療。有殺昆蟲和抗須癬毛菌等真菌的作用。其中所含的過氧化分解酶,具有明顯的抗衰老作用。久服可祛臉上瘢痕,并讓肌膚柔嫩潤滑。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年 

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