當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T豬輪狀病毒A組(PRV-A)核酸檢測試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
豬輪狀病毒A組(PRV-A)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10308 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
JCM1034=KCTC3151模式菌株: no安全等級: 1種屬: Lactobacillus│acidophilus人的排泄物提供形式: 凍干物用于益生菌類保健食品。培養(yǎng)基: CM0789
利文斯頓島希瓦氏菌微生物/耐冷菌模式菌株: no水樣/海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 20℃
假單胞菌能于30℃、48小時降解約30%濃度為200ppm的甲,甲為碳源(無機(jī)鹽培養(yǎng)基)模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: A1生長條件: 30℃
AS3.4254除光學(xué)儀器外的防霉試驗(yàn)菌模式菌株: no種屬: Chaetomium│globosum提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 17生長條件: 28℃
-281℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
AS3.4040生長條件: 25-26℃培養(yǎng)基: 15種屬: Penicilliumitalicum安全等級: 1模式菌株: no
鏈霉菌屬具有人參莖葉總皂苷轉(zhuǎn)化能力模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C
芽孢桿菌屬釀酒用。模式菌株: no窖泥提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0100生長條件: 30℃
鐮孢培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no植物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 18-26℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鞘氨醇單胞菌培養(yǎng)基: 820模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 29℃ 真空冷凍干燥法
鹽生鹽古桿菌培養(yǎng)基: 685產(chǎn)紫膜提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
-282℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
粉褐粉孢牛肝菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-30 定期移植法
鏈霉菌屬培養(yǎng)基: CM0039產(chǎn)生Antibiotic P668 抗真菌提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 50℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 33基因工程常用菌提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
血瓊脂基礎(chǔ)2號250g供分離營養(yǎng)要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板
M-Broth M肉湯/甘露糖肉湯 1.10658.0500 MERCK默克 incubation media M-Broth M肉湯/甘露糖肉湯 1.10658.0500 MERCK默克
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 250g 營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn),還藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201...
恒河猴骨髓間質(zhì)干*培養(yǎng)基TheGangesRIvermonkeybonemarrowmesenchymalstemcellsincompletemedium
E.ColiBroth
酵母蛋白胨培養(yǎng)基 酵母蛋白胨培養(yǎng)基 1萬毫升/袋 制備豬巴氏桿菌滅活疫苗
胰酶牛肉湯 胰酶牛肉湯 1萬毫升/袋 快疫疫苗用
雞鼻炎合成培養(yǎng)基 雞鼻炎合成培養(yǎng)基 1萬毫升/袋 雞鼻炎滅活苗制備用
雙料乳糖膽鹽培養(yǎng)基 Twofold Lactose Bile Salt Broth 250克 化妝品中糞大腸菌群的測定
豬輪狀病毒A組(PRV-A)核酸檢測試劑盒綠膿菌素測定培養(yǎng)基(PDP)規(guī)格:250g用途:用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
無菌采樣袋(12cm*18cm)(帶壓條)規(guī)格:100個/包用途:用于樣品的采樣(小號采樣袋)
HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:5條/盒用途:用于單增李斯特氏菌的生化鑒定組成:木糖發(fā)酵管、鼠李糖發(fā)酵管、SIM生化管、3%過氧化氫酶試劑、葡萄糖、麥芽糖發(fā)酵管、甘露醇發(fā)酵管、七葉苷發(fā)酵管、MR-VP(2孔),共10種生化反應(yīng)。(GB標(biāo)準(zhǔn))
BIGGY瓊脂規(guī)格:250g用途:用于念珠菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
卻普曼瓊脂規(guī)格:250g用途:用于檢測金黃色葡萄球菌
蠟樣芽孢桿菌顯色平板(9cm)規(guī)格:10個/包詳情介紹
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