當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> Cisplatin (DNA交聯(lián)劑/細胞凋亡誘導(dǎo)劑)
貨號 | FS-X10243 |
---|
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Cisplatin 產(chǎn)品規(guī)格:50mg Cisplatin 是一種無機的水溶性的鉑配合物,通過形成DNA 交聯(lián)劑抑制DNA 合成。 Cisplatin 通過與DNA 相互作用形成DNA 交聯(lián)劑誘導(dǎo)細胞毒性,激活多條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路, 包括Erk, p53, p73, 和MAPK,其中對激活凋亡影響大。Cisplatin (30 mM)處理HeLa 細胞6小時,顯著激活Erk,持續(xù)到隨后的14個小時期間。Cisplatin 還具有有效的抗腫瘤活性,誘導(dǎo)腫瘤細胞死亡。Cisplatin 可引起腎小管上皮細胞(RPTC)發(fā)生細胞凋亡,引起細胞收縮,使caspase 3活性提高50倍,磷脂酰絲氨suan外翻提高4倍,染色質(zhì)凝集和DNA 倍性分別提高5 和15倍。Cisplatin (800 μM)處理RPTC 4個小時,產(chǎn)生細胞壞死的典型特征。 別名:cisplatinum, CDDP, Platinol and Platinol-AQ :15663-27-1 分子式:Cl2H6N2Pt 分子量:300.05 儲存:-20℃,有效期36個月 |
中文名稱:Cisplatin (DNA交聯(lián)劑/細胞凋亡誘導(dǎo)劑)
英文名稱:Cisplatin
產(chǎn)品規(guī)格:50mg
貨號:FS-X10243
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
釀酒酵母乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC38A1 大鼠KI-67 免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC25A34 大鼠Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1(KEAP1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化組蛋白H2AX抗體Human SLC25A33 大鼠I型膠原(COL1)免疫試劑盒
平田頭菇6-2磷化熱休克蛋白27抗體Human SLC25A45 大鼠II型角蛋白,骨架71(KRT71)免疫試劑盒
藤黃毛殼磷化熱休克蛋白70抗體Human ATP6AP2(Renin receptor) 大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒
焦曲霉磷化熱休克因子1抗體Human SLC27A2 大鼠GTP KRas 免疫試劑盒
釀酒酵母磷化熱休克因子1抗體Human SLC25A46 大鼠Ghrelin受體(Ghsr)免疫試劑盒
雜色云芝磷化熱休克蛋白70抗體Human SLC27A3 大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒
桔青霉E3泛蛋白連接HACE1抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) 大鼠F-肌動蛋白免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體Human SLC22A15 大鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒
松口蘑肝核因子4α抗體Human SLAIN2 大鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化肝核因子4α抗體Human SLAMF7 大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉相關(guān)蛋白1(FRAP1)免疫試劑盒
鮑魚側(cè)耳淋巴特異性解旋抗體Human SLC10A3 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)免疫試劑盒
竹針孢座囊菌HRAS樣抑制因子2抗體Human SLC12A4 大鼠ERp57 免疫試劑盒
梨多細菌源菌熱休克蛋白家族40抗體Human SLC12A2(Solute carrier family 12 member 2) 大鼠E3-RSIκB 免疫試劑盒
嗜鹽動性球菌糖蛋白P43抗體Human SLC13A4 大鼠D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%白樺脂
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%白樺脂
冰島硫化葉菌Sulfolobus│islandicus 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%羽扇豆
Cisplatin (DNA交聯(lián)劑/細胞凋亡誘導(dǎo)劑)枯草芽孢桿 2-羥基-3-溴-6-磷化α;β水解域包含蛋白5
釀酒酵母 2--3-氟-6-磷化圍脂滴蛋白
立枯絲核 2-溴-6-甲基-3-硝基吡啶堿性磷
韓國靈芝 Boc-DL-乙酰酯
玫瑰栗色鏈霉 四甲基氟化谷脫羧
側(cè)耳屬 3-(甲基磺?;?苯基γ-氨基丁轉(zhuǎn)氨
桿狀毛霉 3-羥基-4,4,4-三氟丁乙酯補體因子D
囊軸發(fā)仙囊軸亞種 喹啉-4-磷化腺活化蛋白激
微核鏈霉 3,4,5-三羧苯二單酰
須芒草伯克霍爾德氏 7-羥基庚腎
樣品粉碎機 (-)-二甲基-2,3-鄰異亞基-L-酯周期依賴性激抑制因子1A
產(chǎn)紫青霉 甘氨酰-L-色P4503A4
大腸埃希 2-溴-4-羥基吡啶補體片段
蘑菇 3-硝基鄰苯二卵清蛋白IgG1抗體
Burkholderia anthina 1-氧雜螺[2.5]辛烷-2-甲卵清蛋白IgG2a抗體
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。