當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T豬附紅細(xì)胞體(SEP)核酸檢測試劑盒
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
豬附紅細(xì)胞體(SEP)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10296 |
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
-253℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
大腸埃希菌用于科研模式菌株: no牛提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
鏈霉菌屬菌種抗恥垢分枝桿菌模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C
韓中類芽孢桿菌培養(yǎng)基: 1001潛在的無機污染物抗性菌/分離自Cr富集菌群沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
草木樨中華根瘤菌固氮模式菌株: no細(xì)齒草木樨提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 27生長條件: 28~30
空腸彎曲桿菌科研教學(xué)模式菌株: no雞空腸提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 42
棉尾孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no棉花葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26--30 定期移植法
-254℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
熱帶假絲酵母培養(yǎng)基: 0013飼料酵母(促進仔豬生長)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌用于飼料添加劑研究。模式菌株: no白藥子提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0033生長條件: 37℃
齒孢青霉培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
JCM9420=ATCC51300=DSM44048=IFO15854=IU模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Nocardiopsis│lucentensisSalt marsh soil提供形式: 凍干物模式菌株培養(yǎng)基: 0423
康寧木霉生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077面包提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-255℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
蘇云金芽孢桿菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 266提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
WILKINS-CHALGREN瓊脂250g厭氧菌的分離培養(yǎng)
MEI培養(yǎng)基 MEI Medium 一步濾膜法顯色檢測或計數(shù)水中的腸球菌
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ) Mycoplasma Broth Base 250 培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
葡萄糖蛋白胨肉湯250g/瓶霉菌、酵母菌檢測(日本藥典)incubationmedia葡萄糖蛋白胨肉湯250g/瓶霉菌、酵母菌檢測(日本藥典)
大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌檢驗培養(yǎng)基
3% NaC1胰胨水發(fā)酵管 3% NaC1胰胨水發(fā)酵管 20支 BR
7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 20支 BR
10% NaC1胰胨水發(fā)酵管 10% NaC1胰胨水發(fā)酵管 20支 BR
山梨發(fā)酵管 山梨發(fā)酵管 20支 BR
豬附紅細(xì)胞體(SEP)核酸檢測試劑盒HBI乳菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:5條/盒用途:用于乳菌的生化鑒定
N-AC-D-氨基葡萄糖規(guī)格:5g用途:微生物指示劑
玫瑰紅鈉瓊脂規(guī)格:BR250g詳情介紹
梭菌增菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于梭菌增菌培養(yǎng)
B5培養(yǎng)基(不含瓊脂)規(guī)格:250g用途:用于植物的組織培養(yǎng)
甘露醇鹽瓊脂規(guī)格:250g用途:用于金黃色葡萄球菌選擇性分離培養(yǎng)
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