當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T新孢子蟲(Ne)核酸檢測試劑盒
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
新孢子蟲(Ne)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10335 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環(huán)數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
細鏈格孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no病葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
熱帶假絲酵母近海酵母模式菌株: no生物樣/秋茄/果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃
需鹽色鹽桿菌海洋石油污染生物修復/生物活性物質篩選模式菌株: no水樣/近海海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃
-338℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
金黃硬皮馬勃培養(yǎng)基: 14模式菌株: no組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-30 定期移植法
釀酒酵母培養(yǎng)基: 0013江都酵母提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
強酒海桿狀菌海洋菌種資源模式菌株: no沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0223生長條件: 30℃
小單孢菌屬抗細菌;抗枯草芽孢桿菌;具有免疫抑制的活性模式菌株: no塘土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C
大腸埃希氏菌含PAO1菌株rhlI基因啟動子區(qū)序列,用于測定rhlI基因的轉錄水平。模式菌株: noLB培養(yǎng)基提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃
大腸埃希菌用于科研模式菌株: no死亡鵝提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
-339℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
玉米大斑病菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
鉤絲孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no根結線蟲提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
黃色赤桿菌海洋細菌多樣性研究 好氧不產氧光合異養(yǎng)細菌多樣性研究模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 511生長條件: 28℃
葡萄炭疽刺盤病植物病原物;用于該類群菌的系統(tǒng)學研究,尤其是與膠盤孢、粘盤孢、盤長孢、盤多毛孢等的系統(tǒng)學研究模式菌株: no紅提葡萄提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 25
DSM43836=AS4.1852=ATCC25664=IFO14215=JCM模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Streptomyces│spiralis土壤提供形式: 凍干物Type strain.培養(yǎng)基: 0038
本甲醚AnisoleCP500ml
ER0803HinfI, HC10000 units6
IB044-100GInositol 肌醇87-89-8100g
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit100ml*5
馬來鈉 (順丁烯二鈉)10g
有機擔體404404 organic supportGC60-80目25g
ER0912VspI (AseI)5000 units8
C0833-100GCTAB 溴代十六烷基三57-09-010
水合錄50g
Urea100*500g
大鼠血小板衍生生長因子A(PDGF-A)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-A ELISA Kit
人粒特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA檢測試劑盒Humangranulocytespecificainuclearaibody,GS-ANAELISAKit 96T/48T
大鼠Ras相關蛋白Rab-11A 免疫試劑盒 Rat Ras-related Protein Rab-11A ELISA Kit
CLIAKitforSP-B(HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinB)ELISAKit人肺表面活性物質相關蛋白B規(guī)格:48T/96T
肉類乙激酶法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitArg人精氨酶規(guī)格:48T/96T
新孢子蟲(Ne)核酸檢測試劑盒果糖規(guī)格:25g用途:微生物指示劑
含225ml LB1肉湯均質袋規(guī)格:10個/包用途:用于李斯特氏菌制樣和前增菌培養(yǎng)(GB 標準)
乙基紫疊氮鈉肉湯(litsky肉湯)規(guī)格:250g用途:用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
改良EC(MEC+n)肉湯規(guī)格:新生霉素用途:4.5mg每支含量
VRB-MUG瓊脂規(guī)格:100g用途:用于大腸桿菌的固體平板檢測(GB標準)
BCYE-CYS瓊脂平板(9cm)規(guī)格:10個/包用途:用于軍團菌的選擇性分離培養(yǎng)
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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