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PIM抑制劑(AZD1208)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 14:29:17瀏覽次數:221次

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貨號 FS-X10454
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中文名稱:PIM抑制劑(AZD1208)

英文名稱:AZD1208

產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10454

產品介紹:

英文名稱:AZD1208

產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

AZD1208是一種新穎的,具有高度選擇性的PIM抑制劑。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1204144-28-4

純度:99.67%

分子量:379.48

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

冠突曲霉染色體分離調節(jié)蛋白1抗體Anti-COL1A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC7)

 Mucilaginibacter mallensis復制激活因子C1抗體Anti-COL3A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC6)

釀酒酵母復制激活因子C2抗體Anti-COL3A1 Antibody組蛋白脫乙酰基5(HDAC5)

孟氏假單胞菌B淋巴受體相關蛋白抗體Anti-COL2A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC4)

透孢犁頭霉磷化急性髓白血病1蛋白抗體Anti-COL3A1 Antibody組蛋白脫乙酰基3(HDAC3)

黑腐皮殼菌受體結合絲蘇激3抗體Anti-COL4A1 Antibody組蛋白脫乙?;?(HDAC2)

衛(wèi)矛擬盤多毛孢胰島單克抗體Anti-COL4A2 Antibody組蛋白脫乙?;?1(HDAC11)

細鏈格孢磷化視網膜母瘤相關蛋白1抗體Anti-COMT Antibody組蛋白脫乙?;?0(HDAC10)

蘋果鏈格孢磷化視網膜母瘤相關蛋白1抗體Anti-COMP Antibody組蛋白脫乙酰基1(HDAC1)

小青霉精神分裂癥相關蛋白9抗體Anti-COL4A1 Antibody(PB0126)組蛋白H4(H4)

雙孢蘑菇周期依賴性激抑制相關蛋白抗體Anti-COL4A1 Antibody組蛋白H3(H3)

大腸埃希菌RNA結合蛋白38抗體Anti-COMT Antibody(PB0568)組蛋白H2B(H2B)

青色鏈霉菌松弛肽/松弛抗體Anti-COMT Antibody組蛋白H2A(H2A)

褐疣柄牛肝菌腎抗體Anti-Connexin 37/GJA4 Antibody組蛋白H1(H1)

枯草芽孢桿菌環(huán)指蛋白20抗體Anti-Connexin 43/GJA1 Antibody組-N-甲基轉移(HNMT)

新城疫病RAN結合蛋白1抗體Anti-Connexin-40(GJA5) Antibody組H4受體(HRH4)

曲霉Aspergillus│sp. 質量規(guī)格:>99%,BR

鹽單胞菌Halomonas│sp. 質量規(guī)格:>98%,BR

45262=CCTCCAA208050=YIM10002資源名稱: 騰沖萊西氏菌 質量規(guī)格:>98%
PIM抑制劑(AZD1208)膨大彎頸霉 2-噻吩基乙酰鈣調依賴蛋白激II

蠟狀芽孢桿 4-(2H-5-四唑)-吡啶磷肌3激

釀酒酵母 5-甲氧基-1-萘滿酮O-6-甲基鳥DNA甲基轉移

大腸埃希氏 3-(2-溴乙基)腦多巴神經營養(yǎng)因子

變幻青霉 2-(2-溴乙基)-1,3-二噁烷Notch受體

Micromonospora 全氟三戊Notch配體

綠色木霉 (S)-5-(吡咯烷-2-基)-1H-四唑α-乳白蛋白;α乳清蛋白

Klebsiella pneumoniae 1-溴-3--5-氟苯ATP合成

皺褶莫氏黑粉 2-(3-溴基)四氫-2H-吡喃內源性

平菇 3-溴硫代苯甲氨基

雅致枝霉 3,5-二苯甲法尼基二磷合

苔草草拉氏桿* 1,1,2,2-氘代四乙烷白介受體相關激3

球毛殼(可訂購) 4-甲基傘形酮酰磷酯白介受體相關激3

異常漢遜酵母異常變種 6-溴-2-羥

腐皮殼屬 七氟丁酐(HFAA)前列腺性磷

 


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