PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數太多，則會出現Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現Smear。
?
參數規(guī)格：
產品名稱：豬瘟病毒(CSFV)核酸定性檢測試劑盒
產品規(guī)格：50T
產品貨號：FS-P10647
產品分類：RT-PCR法
產品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品特點：
本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內切酶消化PCR產物，競爭性模板的產物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產物分開，分別測定熒光強度，根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內標，作出標準曲線，也可實現定量檢測目的。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
DSM  11853模式菌株: 未知

 -964℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

左貝爾海源菌微生物/耐堿菌模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 823生長條件: 37℃

嗜中溫黏著桿菌近海細菌模式菌株: no生物樣/紅樹林腐爛樹根提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃

酵母菌培養(yǎng)基: 0013茅臺酒酵母提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

副干酪乳桿菌培養(yǎng)基: CM0006模式菌株: no奶提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法

傳染性支氣管炎病研究模式菌株: no病死雞腎臟提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37

短小芽孢桿菌培養(yǎng)基: 0081紅麻脫膠提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 33℃ -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；礦物油法

 -965℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

AS3.3447糖化模式菌株: no種屬: Mucor│rouxianus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 25-28℃

地表地芽孢桿菌培養(yǎng)基: 859模式菌株: no砂土提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 70℃ -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

栗疫菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no枝干病斑提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 27 定期移植法

圖畫大洋芽孢桿菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法

嗜乳桿菌1培養(yǎng)基: CM0006模式菌株: no健康孕婦分泌物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結法

 ivcas7.00215模式菌株: no安全等級: 1種屬: Bacillus│thuringiensis土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃

 -966℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

3-四

二烯丙基胺鹽鹽

3-庚

4--3-(三基)硼

Diisopropyl phosphite  亞磷二異丙酯  1809-20-7

Ethyl (R)-3-hydroxybutyrate  (R)-(-)-3-羥基丁乙酯  24915-95-5

3,4-Epoxycyclohexylmethyl 3,4-epoxycyclohexanecarboxylate  3,4-環(huán)氧環(huán)己基甲基 3,4-環(huán)氧環(huán)己基酯  2386-87-0

4-Imidazolemethanol hydrochloride  4(5)-羥甲基咪唑鹽鹽  32673-41-9

大鼠中性粒彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 ，英文名： NE ELISA Kit

人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA檢測試劑盒Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 96T/48T

大鼠丙酮激酶M2型同工酶(M2-PK)免疫試劑盒 Rat Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA Kit

CLIAKitfoLR4ELISAKit大鼠Toll樣受體4規(guī)格：48T/96T

全組織免疫組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)10次

ELISAKitaPT1/aPT2人抗凝血素抗體規(guī)格：48T/96T
豬瘟病毒(CSFV)核酸定性檢測試劑盒三七總皂苷中文別名：三七總皂甙  

英文名：Panax notoginsenosides  

英文別名：Sanqi tofal Saponins  

登錄號：新品待定

分子結構：

外觀：淡黃色無定形粉末

規(guī)格：20 mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的根

溶解性：本品易溶于，乙醇和水，難溶于、和，易吸潮。

藥理藥效：活血祛瘀，通脈活絡。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年