漆酶檢測試劑盒可見分光光度法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63818

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：漆酶檢測試劑盒可見分光光度法

規(guī)格：50管/24樣

檢測方法：可見分光光度法

貨號：FS-01S63818

商品介紹：

測定意義

漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。

測定原理

漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
HSP10/CPN10 熱休克蛋白10抗體 * 0.2ml

ANGPTL6 血管生成相關(guān)蛋白6抗體 * 0.2ml

RCAN2/DSCR1L1 鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白2抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1） * 0.1ml

EDIL3 表皮生長因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 * 0.2ml

GLMN/FK506 binding protein associated protein FK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體（他司相關(guān)蛋白） * 0.2ml

Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體 * 0.2ml

MEOX 2 間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體 * 0.2ml

EphA3/Eph receptor A3 酪蛋白激受體A3抗體 * 0.2ml

EphA6/Eph receptor A6 酪蛋白激受體A6抗體 * 0.2ml

EphA7/Eph receptor A7 酪蛋白激受體A7抗體 * 0.2ml

EphA8/Eph receptor A8 酪蛋白激受體A8抗體 * 0.2ml

EphB1/Eph receptor B1 酪蛋白激受體B1抗體 * 0.2ml

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317) 磷化酪蛋白激受體B1抗體 * 0.1ml

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr331) 磷化酪蛋白激受體B1抗體 * 0.1ml

Kidins220 220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體 * 0.2ml
漆酶檢測試劑盒可見分光光度法油 98%DL-N-乙酰高半胱硫內(nèi)脂 99%IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1

3-基 97%DL-半胱 97%IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島樣生長因子2

8-喹啉磺酰氯 98%DL-高胱 98%IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島樣生長因子1

2,6-二羥基喹啉 90%DL-高半胱硫內(nèi)脂鹽鹽 98%IFN- Gamma(Human Interferon Gamma) ELISA Kit 人γ干擾

(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-雙(二基膦基)二茂鐵基]乙 98%N-基甘 97%ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人間粘附分子1

1-庚烷磺鈉 98%，離子色譜級四氮唑乙 98%HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝生長因子

1-己烷磺鈉離子色譜級,98%氮化鈦 99.5%,2-10 μmGM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒巨噬集落激因子

十二烷基磺鈉離子對色譜磷氫鈣 AR，99.0 %GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子