當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T山羊痘病毒(GTPV)核酸檢測試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
山羊痘病毒(GTPV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10327 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
NRRLY-2081=NCYC603培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no種屬: Pichia│guilliermondii提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
球紅冬孢酵母近海酵母模式菌株: no水樣/海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃
-315℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
冰島硫化葉菌培養(yǎng)基: 453在古菌內(nèi)表達(dá)GST-PCNA3提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 80℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
優(yōu)雅食烷菌有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃
大腸埃希菌用于科研模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
ATCC27366=BCRC12530=DSM43146=IFO13911=JCMType strain;模式菌株: yes種屬: Actinoplanes│italicus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0011生長條件: 28℃
抗生鏈霉菌微生物代謝調(diào)控研究模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 39生長條件: 28℃
芽孢桿菌分類學(xué)研究模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
-316℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
米曲霉培養(yǎng)基: 12酒精工業(yè)、淀粉糖工業(yè)、制酒業(yè)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法;其他
鏈霉菌 真空冷凍干燥法生長條件: 28℃提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 38
根瘤菌培養(yǎng)基: 63模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
六孢毛殼培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26C -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
阪崎腸桿菌研究、質(zhì)量控制模式菌株: no餅干巧克力提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 36℃
香菇培養(yǎng)基: 14試驗(yàn)栽培提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 23-25 定期移植法
Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基25090含微生物樣品的采集、運(yùn)送和保存,特別是空腸彎曲菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌、沙門氏菌和志...
M9CA Broth-capsule 培養(yǎng)基 5capsules incubation media M9CA Broth-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
乙鈣不動桿菌 對防治水稻紋枯病有效 支/瓶
卵磷脂吐溫稀釋液250g樣品制備水稀釋
MiddleBrook7H11Agar
改良馬丁培養(yǎng)基(真菌培養(yǎng)基) 250g 真菌培養(yǎng)及藥品和生物制品無菌檢查用。
高鹽察氏培養(yǎng)基 250g 飼料中霉菌的檢驗(yàn)
察氏培養(yǎng)基 250g 培養(yǎng)能以鹽作為氮源的真菌和細(xì)菌,及青霉和曲霉等霉菌的分離培養(yǎng)和形態(tài)鑒別
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 250g 供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。
山羊痘病毒(GTPV)核酸檢測試劑盒水解乳蛋白規(guī)格:250g用途:提供細(xì)菌生長所需的生長因子
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(第二代)規(guī)格:1000ml用途:用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng),沙門氏菌顯紫色
O157顯色培養(yǎng)基規(guī)格:1000ml用途:用于O157菌的顯色培養(yǎng),O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色
HBI志賀氏菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:5條/盒用途:用于志賀氏菌的生化鑒定,每條包括:半固體瓊脂、β-半乳糖苷酶(ONPG)、葡萄糖銨、西蒙氏枸櫞鹽、色氨肉湯、賴氨脫羧酶肉湯、鳥氨脫羧酶肉湯、氨基脫羧酶對照、尿素酶、粘液鹽測試肉湯、粘液鹽質(zhì)控肉湯、棉子糖、甘油、甘露醇、水楊苷、七葉苷共16種生化反應(yīng)。(GB標(biāo)準(zhǔn))
化鈉蛋白胨緩沖液規(guī)格:250g用途:用于樣品制備的營養(yǎng)液
溶菌酶肉湯基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗(yàn)
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