當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖異生系列>> 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶測試盒50管/48樣
貨號 | BJ-01S10159 |
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操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01S10159 |
商品介紹:
測定意義:
PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,催化草酰乙酸轉化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關鍵酶。
測定原理:
PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
小鼠 IFNE 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNA4 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNA13 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNA14 基因全長ORF克隆
小鼠 BLMH 基因全長ORF克隆
小鼠 IFRD1 基因全長ORF克隆
小鼠 IFRD2 基因全長ORF克隆
小鼠 IFNGR2 基因全長ORF克隆
小鼠 HTR2B 基因全長ORF克隆
小鼠 ENPP2 轉錄變體2 基因全長ORF克隆
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶測試盒50管/48樣大鼠基質(zhì)金屬蛋白14(MMP-14)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
大鼠基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1/Collagenase I)免疫試劑盒*直銷
大鼠肌質(zhì)網(wǎng)膜鈣ATP(SERCA)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠肌酸激同工MM(CK-MM)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠肌酸激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
大鼠肌酸激同工BB(CK-BB)免疫試劑盒*直銷
大鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
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