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貨號 | BJ-X96743 |
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商品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96743 |
商品介紹:
名稱 RKO-AS45-1 (結腸癌轉基因細胞) 別稱RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS45 種屬人類 年齡(性別)不詳 組織來源結腸癌,整合起動GADD45a表達載體的CMV啟動子 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達載體pCMV.3中,轉染結腸癌細胞RKO,建立了RKO-AS45-1細胞株。RKO-AS45-1細胞含有穩(wěn)定整合巨細胞病毒(CMV)啟動子的表達載體,RKO-AS45-1細胞系和它的母系RKO一起可用于GADD45對DNA修復、凋亡和藥物敏感性研究。 生物安全等級2 [Cells Contain CMV viral sequences] 生長培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 基因表達情況p53+ (underexpressed) |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽
RKO-AS45-1 (結腸癌轉基因細胞) 100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH6.5 Bis-Tris Propane,0.2M,pH6.5 常溫保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Somatotropin
2 ug pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 大豆特定基因序列(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
10mg 氨甲喋呤 Amethopterin -20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein A1
1.5mL 酵母tRNA溶液B(精提)(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存
霍亂弧菌成套生化鑒定管 21種*1套/盒*10盒 0.156-10 ng/mL 人MYC關聯(lián)因子X(MAX)ELISA試劑盒
亞硫酸鹽-素-瓊脂基礎 Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base 250g
50T 羊特定基因序列PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒
2 mg 1400W(iNOS抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myeloblastin
UBA培養(yǎng)基 UBA Medium 250g 7.8-500 U/mL 人白介素2受體β亞基 (IL-2-RB)ELISA試劑盒
1%NaCl纖維二糖 20支 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human VPS10 domain-containing receptor SorCS1
2 ug pAHC-17X pAHC-17X 低溫運輸,-20℃保存
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
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