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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>elisa進(jìn)口試劑盒>>小鼠elisa進(jìn)口試劑盒>> 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199elisa進(jìn)口試劑盒
小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)elisa進(jìn)口試劑盒
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse gastric cancer marker CA199ELISA Kit |
貨號(hào) | BJ-G9989 |
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
CL-0381MDA-MB-175VII(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-酪氨酸甲酯質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRBoc-Tyr-OMe
LIPF Others Human 人 Gasic lipase / LIPF 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-O-(2-bromo-Cbz)-L-Tyrosine
人心肌細(xì)胞-心室總RNAHCF-av NABoc-O-叔丁基-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-O-tert-butyl-L-tyrosine
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2 皮下結(jié)締組織細(xì)胞,A9細(xì)胞 CT26.WT[CT26WT]細(xì)胞,小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞N-CBZ-beta-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.98Z-β-Ala-OH
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17CBZ-D-谷氨酸α-芐酯質(zhì)量規(guī)格:>98%Z-Glu-OBzl
LAMP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1-羥環(huán)己基苯酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone
豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1二苯基鎓六氟1酸鹽(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)Diphenyliodonium Hexafluorophosphate
AsPc-1細(xì)胞,人轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞 人正常皮膚細(xì)胞,HaCaT細(xì)胞 小鼠T細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/92-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine
HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2三苯基溴化锍(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Triphenylsulfonium Bromide
Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g2-溴咪唑并[1,2-a]吡嗪質(zhì)量規(guī)格:>98%6-Bromoimidazo[1,2-a]pyrazine
小鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLFmoc-O-叔丁基-L-蘇酸,英文名或英文縮寫:Fmoc-Thr(tBu)-OH,級(jí)別:特,98%,規(guī)格:5克
PC9人肺癌細(xì)胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS3,5,5-三基己醋 3,5,5-Trimqthylhqxcnoic ccid 330-10-1
IL18 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-18 / IL-1F4 蛋白 (His 標(biāo)簽)AGAROSESFR超高分辨率瓊脂糖生物技術(shù)級(jí)白色精細(xì)粉末RTsigma
NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 WEHI 22.1(B細(xì)胞)梭菌蛋白酶,英文名或英文縮寫:Clostripain from Clostridium histolyticum,級(jí)別:BR,規(guī)格:100毫克
CL-0305SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×280-48-8對(duì)磺酸metxyl p-toluesulfonate
小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199elisa進(jìn)口試劑盒J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 LncaP, 人前列腺癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞;SF763胡椒堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Piperine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF紐莫康定B0(肺囊康定) Pneumocandin B0質(zhì)量規(guī)格:>95%
STK40 Others Human 人 STK40 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 福莫特羅 Formoterol 質(zhì)量規(guī)格:>98%
CL-0274EJ(人膀胱癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2溴甲后馬托品Homatropine Methyl Bromide 質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)口原裝
293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系 小鼠原B細(xì)胞,BA/F3細(xì)胞 Hs 181.Tes(正常人細(xì)胞)乙酸阿比特龍酯Abiraterone Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,細(xì)胞色素CYP17抑制劑
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