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貨號 | BJ-X97017 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97017 |
商品介紹:
名稱 肺大靜脈平滑肌細胞 2.組織來源:肺靜脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài),必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈,再入左心室,經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán),才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應(yīng),保持靜脈管腔的通暢,還是多數(shù)動脈疾病的靶細胞。 5.方法簡介: ()實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: ()實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H005 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
重組小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)
重組小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (His 標簽)
重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 標簽)
重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (His 標簽)
重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (His 標簽)
重組雪貂 IFNG / In
肺大靜脈平滑肌細胞Babesia bovis牛巴貝斯蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Goat Anti-human IgG/FITC FITC標記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.3ml
Sarcocystis spp.肉孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
Radix sophorae flavescentis苦參探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周TNFSF14 瘤壞死因子配體超家族成員14抗體 規(guī)格: 0.1ml
Duck Enteritis Virus鴨腸炎病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周BIN2/BRAP1 相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Eimeria spp.艾美耳球蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PTPRA 酪磷酸α抗體 規(guī)格: 0.2ml
Herba houttuyniae魚腥草LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周GPNMB/Osteoactivin GPNMB抗體 規(guī)格: 0.2ml
雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CTBP1 C端結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Blastomyces dermatitidis皮炎芽生探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ADCY3 苷酸環(huán)化3抗體 0.2ml
Pea Enation Mosaic Virus(PEMV)豌豆耳狀突起花葉病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
Duck Astrovirus(DAstV)鴨星狀病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CABLES1 細胞周期蛋白依賴性激CABLES1抗體 規(guī)格: 0.2ml
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