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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> OP9 (小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)
貨號(hào) | BJ-X96495 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96495 |
商品介紹:
名稱 OP9 (小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞) 別稱OP-9 種屬小鼠 年齡(性別)胚胎 組織來源骨髓,基質(zhì) 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 背景描述OP9細(xì)胞源自新生的op/op小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個(gè)突變,OP9細(xì)胞不能生成有功能的巨噬細(xì)胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對(duì)胚胎干細(xì)胞(ES)分化成血細(xì)胞而不是其他巨噬細(xì)胞有抑制功能。OP9細(xì)胞可以用于與小鼠胚胎干細(xì)胞共培養(yǎng)以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細(xì)胞譜系的血細(xì)胞。與OP9細(xì)胞共培養(yǎng)不需要外源的生長(zhǎng)因子或復(fù)雜的胚胎結(jié)構(gòu),這個(gè)系統(tǒng)對(duì)研究造血細(xì)胞的發(fā)育和分化的分子機(jī)理有用。 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEMα+20% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~26小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
人 IL1R9 / IL1RAPL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 IL18RAP / IL1R7 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 DCN / Decorin 轉(zhuǎn)錄變體A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 tPAβ DNA 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 DAN / NBL1 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 S100A4 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 S100B 基因全長(zhǎng)
OP9 (小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 血液瓊脂基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Blood Agar Base供分離營(yíng)養(yǎng)要求較高的致病菌用,后加血液制成血平板250
2 ug pGL4.10[luc2] pGL4.10[luc2] 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 1.56-100 ng/mL 人結(jié)合珠蛋白(Hpt)ELISA試劑盒
1次 96孔板PCR片段純化回收試劑盒(真空法) 0.156-10 ng/mL 人Deltex同源物1(DTX1)ELISA試劑盒
50T 轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人脫氧核糖核酸1(Deoxyribonuclease-1)ELISA試劑盒
100mg 透明質(zhì)酸 Hyaluronidase -20℃保存60%/L氯化鈉蛋白胨肉湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)L Nac1 Peptone Water250克副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)
5mL Proteinase K Solution(蛋白K溶液),10mg/mL Proteinase K Solution(,10mg/mL 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人醛脫氫(Aldehyde oxidase)ELISA試劑盒
1瓶 LTEP-sm株 LTEP-sm 低溫運(yùn)輸和保存 0.78-50 ng/mL 人精液凝固蛋白2(Semenogelin-2)ELISA試劑盒
50T 腎綜合癥漢坦病毒Ⅰ、Ⅱ型通用PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Disabled homolog 2
2 ug pIK pIK 低溫運(yùn)輸,-20℃保存MRS 瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)MRS Agar Base 用于食品中乳酸菌總數(shù)測(cè)定250
營(yíng)養(yǎng)肉汁 Nutrient Broth 250g 0.156-10 ng/mL 鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
1瓶 KU812株 KU812 低溫運(yùn)輸和保存 0.78-50 ng/mL 人生長(zhǎng)激素受體(GH receptor)ELISA試劑盒
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