我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測，全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

?

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯氧乙酸鈉(>98%,BR)Phenoxyaceti acid  salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人骨骼肌細(xì)胞總RNAHSkMC NA水楊酸苯酯(>98%,BR)Phenyl salicylate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1脂酶A2Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格：比活性：>200U/mg，BC

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP)p-Hydroxybenzoic acid butyl ester  salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP

MIApaca-2細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人成纖維肉瘤細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 615小鼠肺癌瘤株;HP615尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR)p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester  salt質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯硫(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC）)Diphenyl sulfide質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC）

人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL4,4'-二氨基二苯(ODA)(標(biāo)準(zhǔn)品)4,4′-Diaminodiphenyl ether質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

S-180細(xì)胞，小鼠肉瘤細(xì)胞 THP-1(單核細(xì)胞白血病) 人細(xì)胞;C-33A二十二烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Docosane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

集落刺激因子4,4'-二氨基二苯硫(標(biāo)準(zhǔn)品)4,4'-Thiodianiline質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丙位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)) γ-Dodecalactone質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)
支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Strontiumchloridehexahydrate六水錄化鍶25克CP，98.5%

恒河猴腎細(xì)胞;RM-1 人胰腺癌細(xì)胞，HPAC細(xì)胞 SGC-7901(胃腺癌細(xì)胞)3-羌基;3-酚;3-同 3-xy7noxypyridinq;3-Pyridinol;3-Pyridonq;β-xy7noxypyridinq 109-00-

人腎癌Wilms細(xì)胞;G401wo7iumcyanate異酸鈉100克CP

IL12A Others Human 人 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 錳鹽營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基10克RT

CM-H021人前列腺平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL38002-45-83-(基硅基)溴3-BROMO-1-(TRImetxYLSILYL)-1-PROPYNE
小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa進(jìn)口試劑盒U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)Picfeltarraenin IV質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCL瓜子金皂苷XXXI(對照品)Polygalasaponin XXXI質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 俾斯麥棕RBismarck Brown R質(zhì)量規(guī)格：BS

小鼠瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1俾斯麥棕YBismarck Brown Y質(zhì)量規(guī)格：BS

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL偶氮氯膦IChlorophosphonazo Ⅰ質(zhì)量規(guī)格：AR,顯色劑
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。