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我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9903 |
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備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白3,5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯(標準品)質量規(guī)格:檢查Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate
NRK(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯噻啶(標準品)質量規(guī)格:檢查Pizotifen
615小鼠癌瘤株;Ca763β-環(huán)糊精(標準品)質量規(guī)格:含量測定β-Cyclodextrin
PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) 卡托普利二硫化物(標準品)質量規(guī)格:檢查Captopril Disulfide
Calu-1 人肺癌細胞鹽酸阿利克侖質量規(guī)格:美國進口Aliskiren
人胚腎細胞;293 [HEK-293]TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆試劑級
TLR4 Others Human 人 TLR4 / CD284 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 流醋鉍 BisMuth sulfctq;BisMuthous sulfctq 7787-68-0
CL-0331CTLL-2(小鼠T細胞)5×106cells/瓶×2Acriflavine黃素100毫克AR,99%
BRL 3A, 大鼠肝正常細胞 人小細胞肺癌,NCI-H209細胞 HIT-T15(倉鼠beta胰島細胞)DANSYLCHLORIDE丹磺酰錄蛋白組學級10G605-65-2Frozen
人導管癌細胞;HCC38Palmiticacid 10g原裝/25g原裝 Sigma P0500
人胚肺細胞系;KuMAPMBP1-本基-3-甲基-4-本甲?;?/span>-5-吡唑啉酮1克BS
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴代十二烷 1-BroMododqccnq 143-12-7
CL-0436SF17(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2縮全;二氧基烷;全縮二醇;二醇縮全 Mqthylcl;DiMqthoxy-Mqthcnq; ForMcl;ForMcldqhydq diMqthyl ccqtcl; 109-87-2
CCNA1 Others Human 人 CCNA1 / Cyclin-A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) TWEEN60吐溫60美國國家處方集級半透明,淡黃色到淺琥珀色,粘稠的漿糊RTsigma
人肺動脈內(nèi)皮細胞RNAHPAEC miRNA5 μg480-44-45.7-二羥基-4-甲氧基黃酮Acacetin
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)elisa進口試劑盒人肝間充質干細胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)井岡霉素Validamycin質量規(guī)格:>98%,BR
CM-R016大鼠胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基100mL腐草霉素Phleomycin質量規(guī)格:≥97%,進分
綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL寡霉素Oligomycin, from Streptomyces質量規(guī)格:>92%,進分
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 Mouse紡錘菌素Netropsin di質量規(guī)格:≥98%,進分
P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢菌素C鋅鹽Cephalosporin C zinc salt質量規(guī)格:美國進口
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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