當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>恒溫?zé)晒夥?/a>>> 50T貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:BJP64601
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
α-內(nèi)啡肽(αEP)檢測試劑盒Anti-CDKN1C Antibody包裝500g
抑制素B(INHB)檢測試劑盒Anti-CDK9 Antibody(原貨號PB0565)包裝100g
生長激素受體(GHR)檢測試劑盒Anti-CDKN1C Antibody包裝25g
玻連蛋白(VTN)檢測試劑盒Anti-CDKN1B Antibody包裝5g
70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)檢測試劑盒Anti-CDO1 Antibody包裝100ml
軟骨糖蛋白39(GP39)檢測試劑盒Anti-CDR2 Antibody包裝25ml
胸腺素β4(Tβ4)檢測試劑盒Anti-CEACAM5 Antibody包裝100g
核因子κB2(NFκB2)檢測試劑盒Anti-CDR2 Antibody包裝500g
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核心信號1(ERN1)檢測試劑盒Anti-CEACAM5 Antibody包裝1g
吻素1(KISS1)檢測試劑盒Anti-CEBPA Antibody包裝100g
微精蛋白β(MSMβ)檢測試劑盒Anti-CEBPA Antibody包裝25g
跨膜絲氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)檢測試劑盒Anti-CEBPB Antibody(原貨號PB0119)包裝500g
貓瘟病毒(FPV)核酸檢測試劑盒奧氏蜜環(huán)菌 PMF1 ELISA Kit僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
克雷伯氏菌 PMFBP1 ELISA Kit規(guī)格: 凍干粉
黑曲霉 KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
空腸彎曲桿菌 PNMA2 ELISA Kit拉丁屬名: jejuni
草鏈霉菌 PMFBP1 ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces graminearus
粉褐粉孢牛肝菌* KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) ELISA Kit用途: 屬外生菌根菌
空泡單胞菌 PMF1 ELISA Kit拉丁屬名: Polaromonas vacuolata
釀酒酵母 PLS1 ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
中慢生華癸根瘤菌 PLP2(Proteolipid protein 2) ELISA Kit用途: 與沙打旺、斜莖黃芪共生固氮
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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