參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:副溶血性弧菌(VP)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:BJP64682
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
?
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
5-O-甲基維斯阿米苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tryptone產(chǎn)品別名: 二乙烯三五乙酸鐵-鈉絡(luò)合物
5-羥甲基糠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DNSCl, Dansyl chloride產(chǎn)品別名: 葡萄糖酸亞鐵鹽
5-羥色酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Ethylmaleimide產(chǎn)品別名: 2,6-二氟對甲氧基苯
5-羥色鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium bicarbonate產(chǎn)品別名: 2-庚
6'''-阿魏酰斯皮諾素英文名稱: Sodium dodecanesulfonate產(chǎn)品別名: 己二酸二辛酯
6''-O-二?;玖夏拒沼⑽拿Q: Theophylline產(chǎn)品別名: 萘1,3,6-三磺酸三鈉鹽水合物
6''-二酸沙苑子苷單酯英文名稱: Cellulase產(chǎn)品別名: 2-溴-7-芴
6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷英文名稱: Chondroitin sulfate產(chǎn)品別名: 壬酸乙酯
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名稱: Isonicotinic acid產(chǎn)品別名: 乙氧基亞甲基二
6,7,4'-三羥基異黃酮英文名稱: L-Malic acid產(chǎn)品別名: 對二乙氧基苯
6-甲氧基二氫血根堿英文名稱: Proteinase K Solution, 20 mg/ml產(chǎn)品別名: 甲酸對甲氧芐酯
6-甲氧基山柰酚-3-O-蕓香糖苷英文名稱: Poly-L-lysine solution ( 0.1%)產(chǎn)品別名: 鹽酸伊托必利
酪氨酸單氧化酶微管相關(guān)蛋白MICAL抗體 Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%
梅克爾-格魯伯綜合征相關(guān)蛋白抗體 Desthiazolylmethyl Ritonavir 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
突變的黑色素瘤相關(guān)抗原1抗體 N-Desmethyl Rosiglitazone-d4 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
黑色素瘤相關(guān)抗原10抗體 Rosiglitazone (potassium salt) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體 rosiglitazone hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 5-Hydroxy Rosiglitazone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
絲裂原活化蛋白激酶組織蛋白1抗體 5-Hydroxy Rosiglitazone Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥90% (HPLC)
同源盒蛋白Meis1抗體 N-Desmethyl Rosiglitazone 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=4%
單氨氧化酶A抗體 5-Hydroxy Rosiglitazone β-D-Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
副溶血性弧菌(VP)核酸檢測試劑盒考克氏菌 MCUR1 ELISA Kit拉丁屬名: Kocuria polaris
啤酒神金黃桿菌 SLIT2(Slit homolog 2 protein) ELISA Kit拉丁屬名: Chryseobacterium gambrini
卷枝毛霉灰藍(lán)變型 MCCC1 ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides f. griseocyanus
微枝形桿菌 MDC1 ELISA Kit拉丁屬名: Microvirga aerophila
糙梗青霉 MCCC2 ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium scabrosum
淺白隱球酵母 BID(BH3-interacting domain death agonist) ELISA Kit拉丁屬名: Cryptococcus albidus
釀酒酵母 PGA3(Pepsin A) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
白藍(lán)放線菌 Smad7/MADH7(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomyces albocyaneus
根瘤菌 TNFAIP6(Tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein) ELISA Kit用途: 與紫穗槐共生固氮
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。