當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> hFOB 1.19 (SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)
貨號BJ-X96671 | 貨號BJ-X96671 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96671 |
商品介紹:
名稱 hFOB 1.19 (SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞) 別稱hFOB1.19; hFOB 種屬人類 年齡(性別)胎兒 組織來源骨;成骨細(xì)胞;以SV40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)多細(xì)胞形態(tài) 背景描述hFOB 1.19細(xì)胞是在0.6mg/mLG418存在下,用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細(xì)胞系。在許可溫度33.5℃下細(xì)胞分裂很快,而在限制溫度39.5℃下細(xì)胞極少分裂或不分裂。hFOB 1.19細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力;hFOB 1.19細(xì)胞提供了一個同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng),用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化、造骨細(xì)胞生理和激素、生長因子和對造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。 生物安全等級2 [Cells contain SV40 viral sequences] 生長培養(yǎng)基DMEM/F12+0.3mg/ml G418+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:34℃ 抗原表達(dá)情況SV40 T antigen 基因表達(dá)情況alkaline phosphatase 注意事項該細(xì)胞培養(yǎng)難度較高;培養(yǎng)溫度為度:33.5℃-34℃;培養(yǎng)基中添加G418。 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人 KIAA1279 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 ADA / Adenosine deaminase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 RIOK1 / RIO kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 ECD / Ecdysoneless homolog 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai
hFOB 1.19 (SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞) 50次 血液DNAout Blood DNAOUT 常溫
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存 1.56-100 ng/mL 人乳腺絲抑蛋白(Maspin)ELISA試劑盒
2mL 硅基磁珠 Magnetic beads,Silicic 4℃密閉、豎直保存
5g 2-( 環(huán)己胺基 ) 乙烷磺酸 CHES(2-(Cyclohexylamino)ethanesulfonic Acid ) 室溫干燥保存
250mL Carnoy固定液 Carnoy Solution 室溫避光保存 15.6-1000 pg/mL 人早老素2(PS2)ELISA試劑盒
50T 口蹄疫病毒亞洲1型PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人胞裂蛋白5(SEPT5)ELISA試劑盒
2 ug pmCherry-LC3 pmCherry-LC3 低溫運輸,-20℃保存
0.1mg 山羊抗兔IgG,異硫酸熒光素標(biāo)記 Goat Anti-Rabbit IgG ,FITC Conjugate 4℃保存 0.312-20 ng/mL 人TBC1域家族成員1(TBC1D1)ELISA試劑盒
10次 百萬堿基級植物DNAout 常溫 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Intelectin-1
10次 克必隆eTS 超敏PCR法cDNA合成試劑盒 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proenkephalin-A
2 ug pFA2-Elk1 pFA2-Elk1 低溫運輸,-20℃保存 12.5-800 ng/mL ELISA Kit for Human Histatin-3
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