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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> NCI-H716 (H716) (結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)
貨號(hào) | BJ-X96723 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96723 |
商品介紹:
名稱 NCI-H716 (H716) (結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 別稱NCI H716; H716; H-716; NCIH716 種屬人類 年齡(性別)男性,33歲 組織來(lái)源器官:盲腸;疾?。航Y(jié)直腸腺癌 生長(zhǎng)特性半貼半懸 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述NCI-H716 [H716]細(xì)胞是從一位經(jīng)5-氟治療的患者腹水中得到的細(xì)胞建立的細(xì)胞株。NCI-H716 [H716]細(xì)胞與其它結(jié)直腸癌細(xì)胞系不同,它有多巴脫羧酶,細(xì)胞質(zhì)中有核心致密的內(nèi)分泌型顆粒。NCI-H716 [H716]細(xì)胞不表達(dá)TAG-72或CA19-9抗原,也不生成癌胚抗原(CEA)。 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~50小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells). |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 NRG1-alpha (ECD) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 FAM3D / Oit1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NCI-H716 (H716) (結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) R2A瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) R2A Agar 250g 31.2-2000 pg/mL 人基質(zhì)金屬蛋白14(MMP-14)ELISA試劑盒
100µL 山羊抗大鼠IgG(H+L),堿性標(biāo)記 Goat Anti-Rat IgG(H+L),AP -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Hyaluronan synthase 1
1 g PDTC (NF-κB抑制劑/抗氧化劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.78-50 ng/mL 轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
50gsu 人重組TFIIB rhTFIIB 4℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase UBR4
10號(hào)培養(yǎng)基(USP) 250g 39-2500 pg/mL ELISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K
2 ug pBC-Hygro pBC-Hygro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
10g B1 Vitamin B1 室溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pro-MCH
50T 副流感病毒Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人肽S-轉(zhuǎn)移A3(Glutathione S-transferase A3)ELISA試劑盒
2 ug pCMV-SPORT6 DYX1C1 pCMV-SPORT6 DYX1C1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Cell surface glycoprotein MUC18
500U 堿性,牛小腸 Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal -20℃保存 1.56-100 IU/mL 人1(PRM1)ELISA試劑盒
4000mL Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) 常溫保存
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