當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> HT-29 (結(jié)腸癌細(xì)胞)
貨號(hào) | BJ-X96437 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96437 |
商品介紹:
名稱 HT-29 (結(jié)腸癌細(xì)胞) 別稱HT 29; HT29 種屬人類 年齡(性別)女性,44歲 組織來源結(jié)直腸腺癌 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述HT-29細(xì)胞是由J·Fogh在1964年用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的;近來,已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含相同血清McCoy's5A培液培養(yǎng)。HT-29細(xì)胞在裸鼠中致瘤,也能在類固醇處理的地鼠中致瘤。HT-29細(xì)胞合成IgA、CEA、蛋白綁定TGF-β的分泌成分和粘液素等。 生物安全等級(jí)1 生長培養(yǎng)基McCoy’s 5A+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~36-60小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters. 受體表達(dá)情況human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A 基因表達(dá)情況secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV). |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
食蟹猴 IL18RAP 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IL1R2 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IL2RG 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IL8RB 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CXCR1 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IL10RB 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IL15 基因全長ORF克隆
食蟹猴 FGF20 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IFNAR1 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IFNAR2 基因全長ORF克隆
HT-29 (結(jié)腸癌細(xì)胞) 100次 中草藥DNAout Herbal DNAOUT 常溫
MPC瓊脂培養(yǎng)基 MPC Agar Medium 250g 0.156-10 ng/mL 人表皮生長因子樣蛋白7 (EGF-like protein 7) ELISA試劑盒
200mL 鹽酸胍溶液,8M Guanidine•HCl Solution 常溫保存
2 ug pNZ8148 pNZ8148 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Ficolin-1
25mL Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Glycerol based) Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Glycerol based) 常溫保存營養(yǎng)瓊脂 (NA) 進(jìn)口、國產(chǎn)Nutrient Agar細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))250
50U T4 DNA 聚合 T4 DNA Polymerase -20℃保存 39-2500 pg/mL 人1型慢收縮性肌肌鈣蛋白I(TNNI1)ELISA試劑盒
念珠菌顯色培養(yǎng)基 Candida Chromogenic Medium 1000ml 62.5-4000 pg/mL 人角蛋白18(KRT-18)ELISA試劑盒
YM培養(yǎng)基 YM Medium 250g 15.6-1000 pg/mL 人胃泌素(Gastrin)ELISA試劑盒
100次 植物種屬鑒定PCR Mix 8(質(zhì)體 rpoC1) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存大豆氫化進(jìn)口、國產(chǎn)HSPC1公斤BR,PC=95%
5g 脂肪 Lipase 4℃保存 0.312-20 ug/mL ELISA Kit for Human Macrosialin
1g Lysozyme, Egg White -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Aggrecan core protein
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
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