當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> WPMY-1 (正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞)
貨號 | BJ-X96783 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96783 |
商品介紹:
名稱 WPMY-1 (正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞) 別稱WPMY1 種屬人類 年齡(性別)男性,54歲 組織來源前列腺/基質(zhì) 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成肌細(xì)胞樣 背景描述肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株,WPMY-1細(xì)胞與RWPE-1細(xì)胞一樣,來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。通過一個pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu),用SV40大T抗原對基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。WPMY-1細(xì)胞與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣,屬于來源于同一個前列腺的一系列細(xì)胞株。由于WPMY-1細(xì)胞與RWPE-1細(xì)胞來源于同一個前列腺的周圍區(qū)域,WPMY-1細(xì)胞株對于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。據(jù)提供者報道,來源于同一個前列腺的RWPE-1細(xì)胞株,經(jīng)過檢測,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基DMEM+5% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人 ORM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 GGT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 TNFSF13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CANX / Calnexin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照
WPMY-1 (正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞) 1mg 鏈霉親和素 Streptavidin -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人α-生育轉(zhuǎn)移蛋白(Alpha-TTP)ELISA試劑盒
膽鹽七葉苷瓊脂 Bile Esculin Agar 250g
1g 洋紅 Carmine 室溫干燥避光保存 0.39-25 ng/mL 人花生四烯酸-15-脂加氧B(ALOX15B)ELISA試劑盒
2 ug pMIR-REPORT Luciferase pMIR-REPORT Luciferase 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
10g 3-(環(huán)己胺)-1-丙磺酸 CAPS 室溫干燥保存
200U GpC 甲基轉(zhuǎn)移 (M.CviPI) GpC Methyltranferase (M.CviPI) -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人的載脂蛋白D(APOD)ELISA試劑盒
100g DNGuSCN(異硫酸胍) 0.312-20 ng/mL 人踝蛋白2(talin 2)ELISA試劑盒
1mL 溶液,100mg/mL Bacitracin Solution -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Growth/differentiation factor 8
500mL Acrylamide: Bis-acrylamide Solution(丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液),19:1 Acrylamide: Bis-acrylamide Solution,19:1 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-1 receptor-associated kinase 3
1瓶 CCC-HBE-2株 CCC-HBE-2 低溫運輸和保存 12.5-800 ng/mL ELISA Kit for Human Intestinal-type alkaline phosphatase
2 ug pRetro-on-EGFP pRetro-on-EGFP 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Acylamino-acid-releasing enzyme
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