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貨號 | BJ-X96511 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96511 |
商品介紹:
名稱 RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細胞白血病細胞) 別稱RBL2H3; RBL 2H3; RBL.2H3 種屬大鼠 年齡(性別)不詳 組織來源外周血;化學(xué)誘變嗜堿性細胞;白血病 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 背景描述RBL-2H3細胞是1978年國立牙科研究所的免疫學(xué)實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。RBL-2H3細胞具有高親和力的IgE受體,通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。RBL-2H3細胞廣泛地用于研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面,包括細胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長,但在某些批號中FcERI集聚后脫?;酶谩A硪恢甏笫笫葔A性細胞株(RBL)不會脫?;?/span> 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM+15%FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~50-60小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 受體表達情況FcERI (Fc of IgE) 基因表達情況histamine |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
人 Vitronectin 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 CYP2D6 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
人 CYP2D6 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 HIF1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
人 HIF1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 OLFM4 基因全長ORF克隆
RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)50T 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Glypican-3
5g 3- 氨基 -9- 乙基咔唑 AEC (3-Amino-9-Ethylcarbazole) 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人 Sestrin 2蛋白(SESN2)ELISA試劑盒
125mL HEPES Lysis Buffer with NP-40,2X HEPES Lysis Buffer with NP-40,2X 常溫保存
2 ug pSE934 pSE934 低溫運輸,-20℃保存Fraser 添加劑進口、國產(chǎn)Fraser Supplement添加到HB4193中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)5ml*2支
培養(yǎng)基1(USP) 250g
5g B6 Vitamin B6 室溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Synaptophysin
125mL Phosphate Buffered RIPA with Glycerol,2X Phosphate Buffered RIPA with Glycerol,2X 常溫保存
5g N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 Acetyl-D-Glucosamine ?20℃保存 0.078-5 EU/mL ELISA Kit for Human Calcitonin gene-related peptide 1
5 mg H-89 . 2HCL(PKA抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 78-5000 pg/mL 人α-烯醇化(Alpha-enolase)ELISA試劑盒
1瓶 U-2 OS-Luc teT-on株 U-2 OS-Luc teT-on 低溫運輸和保存 0.625-40 ng/mL 人泛素蛋白連接E3成分N-識別蛋白4ELISA試劑盒
2 ug pET-33b(+) pET-33b(+) 低溫運輸,-20℃保存乳糖肉湯 進口、國產(chǎn)Lactose Broth用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌250
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